細胞的定量測定圖像分析軟件-倒置圖像顯微鏡
為細胞生長而維持正確的生理學條件的方法有關(guān),而不是主要
改變培養(yǎng)容器的設(shè)計。單層細胞培養(yǎng)系統(tǒng)(貼壁依賴細胞)在單位系
統(tǒng)中大規(guī)模的培養(yǎng)是很困難的,但與多次重復(fù)操作不同,現(xiàn)在已經(jīng)
發(fā)展了廣泛的各種培養(yǎng)系統(tǒng)。其目的是增加為細胞可利用的表面面
積,此面積與培養(yǎng)液和成功到達總培養(yǎng)的體積有關(guān)。
細胞培養(yǎng)更為綜合的方面是首先要先討論的,這樣才更能理解
這些技術(shù)操作方法。
一般方法和培養(yǎng)參數(shù)
熟悉某些生物學概念和方法是著手大規(guī)模細胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)。在
小規(guī)模培養(yǎng)中,經(jīng)常存在偏差導致某些錯誤。如果培養(yǎng)失敗是掃興
的,但不一定會在時間和用費上造成大損失。在大規(guī)模細胞培養(yǎng)中
,由于培養(yǎng)范圍擴大也就表示投資者人力物力的更大增加。培養(yǎng)失
敗就會相當嚴重,而同時培養(yǎng)系統(tǒng)會進一步要求更嚴格地遵守所有
的條件。在這一部分是討論整個·大規(guī)模細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的基本要素
,如果培養(yǎng)容量還要增大,或培養(yǎng)的設(shè)計和操作要改變時,必需要
注意上述要素。
細胞的定量測定
測定細胞總數(shù)(用血細胞計數(shù)器計數(shù)整個細胞數(shù)或染色細胞核
數(shù)),以及細胞總量(檢測細胞蛋白質(zhì)總量或干重),都是容易做到
的。但測定細胞活性比較困難,因為所使用的方法是用對細胞產(chǎn)生
應(yīng)激反應(yīng)來測定一個特異而非經(jīng)典的細胞生理學參數(shù)。另外的困難
是很多培養(yǎng)系統(tǒng)不能取到細胞樣品(大多數(shù)屬貼壁依賴細胞),或不
能用肉眼檢查,因而必需進行非直接的測定。
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