體視(解剖)顯微鏡下分離新生大鼠視網(wǎng)膜步驟
做視網(wǎng)膜細胞培養(yǎng)都要取新生大鼠視網(wǎng)膜,
我們實驗室都照此程序:
1.將新生大鼠放進75%酒精中浸泡1分鐘,鑷子頸部脫臼處死
2.顯微剪剪開眼瞼皮膚,暴露眼球
3.用眼科鑷將眼球取出,可見其后視神經(jīng),放入盛有Hanks液皿中
4.在體視(解剖)顯微鏡下盡可能修剪球周組織,并移入另一盛有Hanks液的皿中
5.在體視(解剖)顯微鏡下,用無恥顯微鑷和顯微剪沿眼球赤道部或者稍前環(huán)狀剪開,棄掉角膜、晶體、玻璃體,并分離視網(wǎng)膜和鞏膜,在視網(wǎng)膜靠近玻璃體側(cè)有時可見視網(wǎng)膜血管,需要將其剝盡,將視網(wǎng)膜放進另一皿中,待用
這種方法優(yōu)點是視網(wǎng)膜完整,但是速度很慢,醫(yī)院實驗室稍作修改:
1-4同上,(4中后來的皿中不放Hanks)
5.在體視(解剖)顯微鏡下,用無恥顯微鑷和顯微剪沿眼球赤道部或者稍前剪開少許(約1/4),輕輕擠壓眼球,可見視網(wǎng)膜和玻璃體一起擠出,將玻璃體去除,并將視網(wǎng)膜血管去除,剩下的視網(wǎng)膜也可備用
此法的缺點是視網(wǎng)膜不完整,但是速度很快
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