SRD5A1蛋白；類固醇5Α還原酶1(SRD5A1)重組蛋白

英文名稱：Recombinant Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1)

3-Oxo-5 Alpha-Steroid Delta 4-Dehydrogenase Alpha 1

來源：原核表達

宿主：E.coli

規(guī)格：10μg  50μg  200μg  1mg  5mg

內(nèi)毒素水平： 1.0EU/μg(LAL法測定)具體詳見說明書

片段與標簽：N-terminal His Tag

物種來源（人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、獼猴、山羊、綿羊、馬、牛、豬、雞、狗等其他物種多物種）相同的名稱，不同的物種。

性狀：凍干粉

表達系統(tǒng)：  大腸桿菌

產(chǎn)品純度： 95%-98%（SDS-PAGE RP-HPLC）

保存條件：如果樣品在2-4周內(nèi)使用，可以在4°C低溫儲存。 

SRD5A1蛋白；類固醇5Α還原酶1(SRD5A1)重組蛋白長期儲存，建議添加載體蛋白（0.1％HSA或BSA），并儲存在-20~ -80°C。避免多次凍融。

影響蛋白原核表達的因素很多，如蛋白的親水性、密碼子的稀有性、蛋白毒性等。如疏水性過強，就難以表達；稀有密碼子過多或多個稀有密碼子連在一起也難以表達。我以前也遇到過這種情況，首先要分析你的蛋白序列和二級結(jié)構(gòu)，看看是否存在這些影響因素。如果必須要表達全長蛋白，像你這種情況難度就比較大，可以進行密碼子的改造，或者更換載體，或者更換宿主菌?？茨阍囼灥哪康?，如果不需要表達全長蛋白，如表達部分抗原性強的片段，可以簡單一點，表達部分片段即可。

SRD5A1蛋白；類固醇5Α還原酶1(SRD5A1)重組蛋白原核表達秘笈：表達前的分析比什么都重要：

表達不同于其它一些實驗，比如：提取質(zhì)粒、PCR、電鏡切片，這些人為控制的因素比較多，出問題相對來說也比較好分析。表達呢，你把質(zhì)?？寺『美?，交給細胞，然后有些事情就不全是你要怎樣就怎樣了。原核表達在表達當中來說還是比較簡單，細菌培養(yǎng)條件簡單、生長速度快，需要的儀器和培養(yǎng)基都比較便宜。當然，它也存在一些缺乏高級修飾、細胞內(nèi)部還原性過高等缺點。

原核表達從一開始的設計就非常重要，所謂好的開始是成功的一半。做足準備功夫，可是省去很多將來后悔的事情。首先，我們要根據(jù)是否要求可溶將載體分成兩大類，如果希望可以同時嘗試多種表達系統(tǒng)，也有許多商業(yè)化的系統(tǒng)供選擇。

前面已經(jīng)介紹過許多公司的商業(yè)化載體、菌株和多系統(tǒng)表達體系，現(xiàn)在我想先從自己的蛋白分析講起。同樣的載體、同樣的系統(tǒng)，很可能表達這個蛋白表達量奇高，但是另外一個就是做不出來，所以沒有全能的載體，只有永恒的分析。當然如果你的蛋白曾經(jīng)在原核系統(tǒng)中成功表達出來那是好的，SRD5A1蛋白；類固醇5Α還原酶1(SRD5A1)重組蛋白選擇同樣的載體表達成功率會高很多。如果沒有也好嘗試找一些曾經(jīng)表達過和你的蛋白擁有相類似結(jié)構(gòu)的文獻。比如大部分含有哺乳動物src同源的SH2蛋白相互作用域的蛋白都是用pGEX系列載體表達出來的。根據(jù)經(jīng)驗而言，含有較少半胱氨酸和脯氨酸的、平均大小為60kD的單體蛋白較容易表達。