HEPES的合成步驟相對于十分復雜,其中必需經過三個節(jié)目內。第一個節(jié)目內催化的化學物質被稱作衍生物w,第二個節(jié)目內催化的化學物質稱之為衍生物d。待衍生物w和衍生物d催化再行后,才都會離開第三個節(jié)目內,也就是生命體滑動催化劑HEPES的催化步驟。第一個節(jié)目內首先準備加工六水哌嗪,使其揮發(fā)在甲醛氣態(tài)混合物之中,從而成形淡黃色光亮的氫氧化鈉。該氫氧化鈉在80攝氏度的防水必需下,不停移入并且不停加進二甲胺上去。等到反應物落幕后來,專業(yè)人士試驗技術人員可以實行減壓蒸餾的新方法祛除甲醛,然后采用分餾法分開并且蒸餾存留的化學物質,這時候整理到的沸程為125 到127攝氏度的餾出物,就是衍生物w。第二個節(jié)目內的第一步是收一個試管,向里加進井水和硫酸亞硫酸鈉。接著在試管邊上透過水浴開展攪拌,當質子化滴低溫超出90攝氏度時,要依然始終保持這個低溫,隨后冷水1,2安苯甲醛,滴加落幕后暫時移入。下一步是使質子化滴屬于70攝氏度的水浴之中開展缺氧成品,直到析置全部的紅色晶體,然后將該紅色晶體微粒在95%的乙醇溶液之中,攪拌移入,趁熱去除調不溶物。清液在大氣壓力安放投宿。第二天,用布氏漏斗抽濾整理紅色片狀混合物。即為衍生物d。HEPES生命體滑動催化劑的催化步驟:準備試管,向酒杯之中取出衍生物w,d和井水,研磨變成HN少于3的淡黃色光亮清液,抗110到115攝氏度油浴防水。然后重啟攪拌器,質子化二十分鐘后,HN升高到9。此時滴加硫酸5N,始終保持PH值處在9到10的線路。待HN不穩(wěn)定的后,中止硫酸的加進,乞求暫時移入明白質子化落幕。接著對蒸發(fā)的質子化滴采用水來開展揮發(fā),用氣相塑料[R+]*層析柱去鹵制備。層析給予的整理滴缺氧成品,用氫氟酸氧化鋅去除。暫時成品淡黃色光亮清液成厚汁螺旋狀,將其趁熱撐至凝固的95%甲醛之中,透過冰醋酸變動HN為5,幾天后加進無水乙醇,紅色晶體結構再一析置。常壓蒸發(fā),0攝氏度安放投宿。當晚,用布氏漏斗抽濾整理混合物,要用冰冷無水乙醇沖洗。將沖洗再行后的晶體結構微粒在95%甲醛之中,對其攪拌到75攝氏度,煮沸浸泡超出以外揮發(fā)平衡狀態(tài)。然后趁熱去除,投身無水乙醇到清液里,用力下自然環(huán)境蒸發(fā),慢慢地析置紅色二氧化硅。舉例來說0攝氏度安放投宿。同日用布氏漏斗抽濾整理混合物,要用冰冷無水乙醇沖洗,80攝氏度烘箱開展洗凈處理過程,就能給予HEPES。