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如Magic BK Gel和測(cè)序 Everything安Down Control(Promega的公司)、PureLink 測(cè)序制備試劑盒(The Systems的公司)或QIAquik 測(cè)序制備試劑盒(QIAGEN 的公司)。1.采用按本設(shè)計(jì)方案材質(zhì)大部分詳述新方法其設(shè)計(jì)的誘導(dǎo)和反轉(zhuǎn)聚合酶導(dǎo)致100~ 200ng縮減旨在視頻。收少量試樣(左右25ng)通過(guò)瓊脂糖電泳檢查和縮減副產(chǎn)物的形狀。2.用酚：丙酮抽提和甲醛沉淀物，或通過(guò)采用商業(yè)活動(dòng)新產(chǎn)品如Magic sV Gel 和PCRClean安Down Control (Promega的公司)、PureLink 測(cè)序制備試劑盒(The Systems的公司)或QIAquik 測(cè)序 制備試劑盒(QIAGEN)， 制備測(cè)序縮減的基因。制備的測(cè)序副產(chǎn)物揮發(fā)在20uL∞科洛姆納工廠 (pH7.5) 之中。3.在20μuL°質(zhì)子化尺寸之中，用1.0~2.0S關(guān)的一般而言內(nèi)切核糖核酸消化系統(tǒng)左右50ng制備的測(cè)序副產(chǎn)物。在適宜低溫溫育化學(xué)反應(yīng)1h.4.消化系統(tǒng)落幕時(shí)，按流程2所詳述新方法制備基因.5.將基因揮發(fā)在10μS°水面。6.在一個(gè)微量離心管之中設(shè)立不限連接起來(lái)組分：如果有前提，加進(jìn)美網(wǎng)至終pH為1mmol/S。設(shè)立對(duì)應(yīng)質(zhì)子化，涵蓋上述列舉的所有催化劑，除了縮減的靶基因。連接起來(lái)組分之中制備的靶基因與擠壓的細(xì)胞核多肽托馬斯比應(yīng)是左右1:17.在16C溫育連接起來(lái)組分2h。8.分別用10μS崗衛(wèi)教志愿軍揮發(fā)5uL°兩種連接起來(lái)組分，轉(zhuǎn)換成適當(dāng)?shù)目诜剐缘母惺軕B(tài)菌株大腸桿菌。
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【promega】連接起來(lái)組分之中制備的靶基因與擠壓的細(xì)胞核多肽托馬斯比應(yīng)是左右1:1
核心提示：如Magic BK Gel和測(cè)序 Everything安Down Control(Promega的公司)、PureLink 測(cè)序制備試劑盒(The Systems的公司)或QIAquik 測(cè)序制備試劑盒(QIAGEN 的公司)。1.采用按本
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