2月7日，國(guó)家衛(wèi)生健康委辦公廳公布了《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第四版）》，并在附件公布了針對(duì)新冠病毒的最新實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指南——《新型冠狀病毒肺炎 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南（第四版）》（下簡(jiǎn)稱指南），重點(diǎn)從檢測(cè)標(biāo)本采集和核酸檢測(cè)方法等維度，對(duì)新冠病毒的檢測(cè)工作作出要求。

指南主要針對(duì)比較成熟、易于實(shí)施的核酸檢測(cè)方法，即采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR進(jìn)行鑒定，推薦選用針對(duì)新型冠狀病毒的ORF1ab、N基因區(qū)域的引物和探針。 

結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)為：

陰性:無Ct值或Ct 40。

陽性：Ct值 37，可報(bào)告為陽性。

灰度區(qū)：Ct值在37-40之間，建議重復(fù)實(shí)驗(yàn)，若重做結(jié)果Ct 43 值 40，擴(kuò)增曲線有明顯起峰，該樣本判斷為陽性,否則為陰性。

另外，根據(jù)指南規(guī)定，在實(shí)驗(yàn)室要確認(rèn)一個(gè)病例為陽性，滿足以下條件： 同一份標(biāo)本中新型冠狀病毒2個(gè)靶標(biāo)（ORF1ab、N）特異性實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)結(jié)果均為陽性。如果出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽性的 檢測(cè)結(jié)果，則需要重新采樣，重新檢測(cè)。另外陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染，需要排除可能產(chǎn)生假陰性的因素。

在標(biāo)本采集方面，指南主要從采集對(duì)象、采集要求、采集種類等維度進(jìn)行了規(guī)定。要求采集的標(biāo)本主要包括病人的上呼吸道標(biāo)本、下呼吸道標(biāo)本、眼結(jié)膜拭子、糞便標(biāo)本、抗凝血和血清標(biāo)本等。臨床標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道標(biāo)本（尤其是下呼吸道標(biāo)本）和發(fā)病 7 天內(nèi)急性期血清以及發(fā)病后第 3～ 4 周的恢復(fù)期血清。

指南還對(duì)10種標(biāo)本的采集方法做出規(guī)定，包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物或呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液、深咳痰液、血液標(biāo)本、糞便標(biāo)本和眼結(jié)膜拭子標(biāo)本等。

1．咽拭子：用2根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時(shí)擦拭雙 側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含3ml病毒保存液（也可使用等滲鹽溶液、組織培養(yǎng)液或磷酸鹽緩沖液）的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。

2．鼻拭子：將1根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子輕輕插入鼻 道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。取另一根聚丙烯纖維 頭的塑料桿拭子以同樣的方法采集另一側(cè)鼻孔。上述兩根拭子 浸入同一含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。

3．鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用與負(fù)壓泵相連的收集器 從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。將收集器頭部 插入鼻腔或氣管，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出，收 集抽取的粘液，并用3ml采樣液沖洗收集器1次（亦可用小兒導(dǎo) 尿管接在50ml注射器上來替代收集器）。

4．深咳痰液：要求病人深咳后，將咳出的痰液收集于含3ml 采樣液的50ml螺口塑料管中。

5．支氣管灌洗液：將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入 氣管（約30cm深處），注入5ml生理鹽水，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集 38 器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液沖洗收集器1 次（亦可用小兒導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來替代收集）。

6．肺泡灌洗液：局部麻醉后將纖維支氣管鏡通過口或鼻經(jīng) 過咽部插入右肺中葉或左肺舌段的支管，將其頂端契入支氣管 分支開口，經(jīng)氣管活檢孔緩緩加入滅菌生理鹽水，每次30～50 ml，總量100～250ml，不應(yīng)超過300ml。

7．血液標(biāo)本：建議使用含有EDTA抗凝劑的真空釆血管采集 血液標(biāo)本5ml，室溫靜置30分鐘，1500～2000rpm離心10分鐘，分別收集血漿和血液中細(xì)胞于無菌螺口塑料管中。

8．血清標(biāo)本：用真空負(fù)壓采血管采集血液標(biāo)本5ml，室溫靜 置30分鐘，1500～2000rpm離心10分鐘，收集血清于無菌螺口塑 料管中。

9．糞便標(biāo)本：如患者發(fā)病早期出現(xiàn)腹瀉癥狀，則留取糞便 標(biāo)本3-5ml。 

10．眼結(jié)膜拭子標(biāo)本：眼結(jié)膜表面用拭子輕輕擦拭后，將拭子頭進(jìn)入采樣管中，尾部棄去，懸緊管蓋。

另外，根據(jù)目前掌握的新型冠狀病毒的生物學(xué)特點(diǎn)、流行病學(xué)特征、臨床資料等信息，指南規(guī)定：標(biāo)本采集、運(yùn)送、存儲(chǔ)和檢測(cè)暫按二類高致病性病原微生物管理，管理的方面包括病毒培養(yǎng)、動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)、未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的操作、滅活材料的操作等，具體詳情見附件。

指南還強(qiáng)調(diào)，采樣人員個(gè)人 防護(hù)裝備（personal protective equipment，PPE）要求：N95 及以上防護(hù)口罩、護(hù)目鏡、連體防護(hù)服、雙層乳膠手套、防水 靴套；如果接觸了患者血液、體液、分泌物或排泄物，應(yīng)及時(shí) 更換外層乳膠手套。

《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第四版）》中還對(duì)疫情防控措施，病例監(jiān)測(cè)方案、病例密切接觸者管理方案等進(jìn)行了規(guī)定和梳理，詳情見附件原文。

附件：新型冠狀病毒肺炎防控方案（第四版）