色譜分離是利用混合物中各組分在兩相中分配系數(shù)不同，當流動相推動樣品中的組分通過固定相時，在兩相中進行的連續(xù)多次反復的分配，從而形成差速移動，達到分離目的的方法。
 

色譜分離技術是基于不同物質在由固定相和流動相構成的體系中具有不同的分配系數(shù)，在采用流動相洗脫過程中呈現(xiàn)不同保留時間，從而實現(xiàn)分離。傳統(tǒng)色譜分離技術采用固定的色譜塔進行，先進入一定量物料，然后采用洗脫劑不斷洗脫，在同一出口在不同時間段就可接到不同的產品組分，此過程費時費力。經過分析并加以改進，把固定相的樹脂做成可以連續(xù)流動的系統(tǒng)，利用物質與固定相的相對運動速度不同實現(xiàn)分離。把固定相比成一個傳送帶，分別比成快慢不同的兩組份，只要使固定相加上一個與洗脫方向相反的驅動力，使傳送帶運動速度處于速度中間，跑的快的比固定相快。從前頭得到，跑得慢的被傳送帶帶到后面得到。
 

色譜法簡單分為氣相色譜法、液相色譜法、超臨界流體色譜法。根據氣相和液相制備的不同，再分為填充柱色譜法、毛細管色譜法、經典液相色譜柱法、高效液相色譜法、薄層色譜法、紫色普法、毛細管電泳法。無論怎么分類，都有共同的特點：凡是色譜分離都具有固定相和流動相；固定相是不動的，流動相相對于固定相做相對運動；被分離的組分與流動相和固定相都有不同的作用力。這種作用力有吸附力、溶解力、離子交換能力等。
 

根據分離原理還可將色譜法分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜、電泳色譜、氣相色譜等。利用物質吸附能力不同進行分離的稱為吸附色譜，常用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、聚酰胺、活性炭、大孔吸附樹脂等。利用物質在兩相不互溶的溶劑中的分配比不同進行分離的稱為分配色譜，常用的支持劑有硅膠、硅藻土、纖維粉等。液滴逆流色譜和高速逆流色譜則是在分配色譜與逆流分溶相結合的基礎上發(fā)展而成的一種新技術。利用物質解離程度不同進行分離的稱為離子交換色譜，常用的離子交換樹脂有強酸型(磺酸型)、強堿型(季胺型)、弱酸型(羧酸型)、弱堿型(三級胺型)等。利用物質分子大小不同進行分離的稱為凝膠色譜(亦稱分子篩或排阻色譜)，常用的支持劑有葡聚糖凝膠、羥丙基葡聚糖凝膠等。利用電流通過時，離子趨電性不同進行分離的稱為電泳色譜，常用的有紙電泳、瓊脂電泳、凝膠電泳等。

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