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公司全部產(chǎn)品進入。。。

細胞名稱 上海中科院細胞庫 ATCC細胞庫|HT-1080細胞

HT-1080人纖維肉瘤細胞|HT-1080細胞

生長特性 貼壁生長

形態(tài)特性 上皮樣

產(chǎn)品規(guī)格 1 10^6 cells/瓶

培養(yǎng)條件 MEM+10%FBS+1%P/S

生長條件 氣相：5%CO2  95% 空氣   溫度：37 ℃

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

背景資料 最初認為這個細胞源自喉上皮癌，但隨后通過同功酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn)，起源細胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

HT-1080人纖維肉瘤細胞|HT-1080細胞常規(guī)說明：

凍存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液

細胞質(zhì)檢情況：不含細菌、真菌、支原體等微生物污染

傳代建議：1:2~1:3傳代，2~3天換液1次

特別提醒：簽收細胞后，如細胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問題，煩請當天盡快聯(lián)系，以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請務(wù)必重視。

一、 細胞復蘇

1. 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。

2. 把上述細胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中（用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來），1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

3. 把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動，使培養(yǎng)皿中的細胞均勻分布。

4. 標好細胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細胞貼壁后換培養(yǎng)基。

5. 3天換一次培養(yǎng)基。

二、HT-1080人纖維肉瘤細胞

1. 培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。

2. 把原有培養(yǎng)基吸掉。

3. 加適當?shù)囊鹊鞍酌福芨采w細胞就行），消化1-2分鐘。

4. 細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。

5. 用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。

6. 把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

7. 倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細胞都吹起來。

8. 根據(jù)細胞種類把細胞傳到幾個培養(yǎng)皿中。一般，癌細胞分5個，正常細胞傳3個。繼續(xù)培養(yǎng)。

三、HT-1080人纖維肉瘤細胞凍存

把細胞消化下來并離心（同上）。用配好的凍存液把細胞懸浮起來，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫明細胞種類，凍存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃過夜，然后放到液氮灌中保存。

凍存液的配制： 70%的完全培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

要注意的就是無菌操作！

上海中科院細胞庫 ATCC細胞庫|HT-1080細胞

HT-1080人纖維肉瘤細胞脂肪細胞在能量儲存和代謝過程中有著重要的作用。
脂肪細胞分化是一個發(fā)展的過程，它對代謝穩(wěn)態(tài)和營養(yǎng)信號很重要。
它由復雜的過程控制，如基因表達和信號轉(zhuǎn)導。
前脂肪細胞存在于成人脂肪組織中，能根據(jù)能量的平衡增殖和分化成熟的脂肪細胞。
前體細胞的增殖和分化能夠增加脂肪組織的體積。
在體外培養(yǎng)中，不同的組織來源前脂肪細胞的油脂含量，成脂轉(zhuǎn)錄因子表達和TNFalpha誘導的凋亡均有不同。
同時研究表明它還與脂肪分化以及許多生理病理過程密切相關(guān)，如脂肪代謝、能量平衡、肥胖、糖尿病、高血脂和乳癌。

HS683 人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞） 7210 人脂肪細胞-內(nèi)臟提取于內(nèi)臟脂肪組織， 7200 人脂肪細胞-皮下提取于人皮下脂肪組織，*代凍存，每管含有細胞數(shù) 1 106 cells/ml，此細胞通過CD44, CD90免疫熒光染色和脂肪染色驗證，經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。 

推薦培養(yǎng)基:（PAM, Cat. No. 7211）
其他產(chǎn)品信息：

NDB0385-100ml Nonidet P-40 （NP-40） 諾納德 P-40 [9016-45-9] 100ml
NDB0385-500ml Nonidet P-40 （NP-40） 諾納德 P-40 [9016-45-9] 500ml
NE109-100ml Nonidet P-40 （NP-40） 諾納德 P-40 [9016-45-9] 100ml
NE109-500ml Nonidet P-40 （NP-40） 諾納德 P-40 [9016-45-9] 500ml
N6250-100g Norfloxacin 諾氟沙星 [70458-96-7] 100g
N2858-25g DL-Norvaline DL-正纈氨酸 [760-78-1] 25g

細胞培養(yǎng)常見問題及解決方法

問題

原因

解決方案

細胞生長緩慢

生長培養(yǎng)基使用不當

按照生產(chǎn)商的建議，使用相應(yīng)的預熱生長培養(yǎng)基。

生長培養(yǎng)基中血清質(zhì)量差

使用其他批次血清。

傳代操作不當

按照生產(chǎn)商的建議消化時間及傳代比例進行操作。

換液過于頻繁

降低換液頻率，參考生產(chǎn)商推薦的換液頻率。

細胞傳代次數(shù)過多

使用傳代次數(shù)較少的健康細胞。

細胞生長超過匯合狀態(tài)

哺乳動物細胞傳代應(yīng)在細胞處于對數(shù)期、未達到匯合狀態(tài)時進行，建議細胞密度達 80-90%傳代。

細胞被支原體污染

將細胞、培養(yǎng)基和試劑丟棄；新取一只凍存細胞，并且使用新的培養(yǎng)基和試劑。

細胞復蘇存活率低

細胞凍存不當

新取一只凍存細胞，并儲存在液氮中。將細胞儲存在液氮中，直至復蘇。

自行制備的凍存細胞無活性

將細胞按照生產(chǎn)商推薦的密度凍存。

制備凍存細胞時使用傳代次數(shù)少的細胞。

嚴格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序凍存細胞。請注意本手冊推薦的冷凍程序是凍存細胞的一般流程，只能作為指導原則使用。

新取一只凍存細胞。

細胞復蘇方法不當

嚴格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序復蘇細胞。請注意本手冊推薦的解凍程序是復蘇細胞的一般流程，只能作為指導原則使用。

確保冷凍細胞解凍迅速，接種前用預熱的生長培養(yǎng)基緩慢稀釋細胞。

復蘇培養(yǎng)基使用不當

使用生產(chǎn)商推薦的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基使用前已經(jīng)預熱。

細胞稀釋過度

按照生產(chǎn)商的建議，將解凍后的細胞高密度接種，以改善復蘇效果。

處理細胞時動作不夠輕柔

凍存和復蘇過程對大多數(shù)細胞都會造成不利影 響。不要通過渦旋振蕩或者用力敲打培養(yǎng)瓶的方法使細胞脫落(培養(yǎng)昆蟲細胞時除外)，也不要高速離心細胞。

凍存液中所用保護劑在儲存過程中未避光

如果未避光儲存，凍存保護劑會轉(zhuǎn)變?yōu)閷毎卸拘缘奈镔|(zhì)；新取一只凍存保護劑，重新凍存細胞。

 ★由于細胞庫現(xiàn)有細胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯誤，需要了解相關(guān)細胞價格及詳細資料直接call，對您造成的不便還請見諒！
 ★注：如運輸過程中導致細胞污染或者死亡，我們將無條件補發(fā)
       收貨后十個工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價重發(fā)
最后，通過低溫保藏儲備一些細胞，以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象，或常規(guī)檢測呈陽性結(jié)果，那么最可靠的補救措施是扔掉所有培養(yǎng)物，清潔培養(yǎng)箱和超凈臺，一切從頭開始。當然，你得確保儲備的細胞是不含支原體的。