全球第一臺可以實時定量蛋白-細(xì)胞相互作用的系統(tǒng)
全球第一臺可以計算細(xì)胞表面受體數(shù)量的系統(tǒng)
源于烏普薩拉大學(xué)生物醫(yī)學(xué)放射學(xué)實驗室的先進(jìn)技術(shù)

LigandTracer系列儀器的研發(fā)團(tuán)隊來自于Ridgeview Instruments AB，起源于素有瑞典的劍橋大學(xué)、美蘇核競爭見證人之稱的瑞典烏普薩拉大學(xué)，瑞典烏普薩拉Ridgeview Instruments AB團(tuán)隊研發(fā)出全球第一臺SPR技術(shù)（現(xiàn)為美國GE公司Biacore產(chǎn)品），開創(chuàng)了蛋白相互作用的新領(lǐng)域。但經(jīng)典的SPR技術(shù)主要用于大分子相互作用實時分析，而無法滿足蛋白和細(xì)胞，蛋白和組織相互作用的實時分析。隨著蛋白研究的深入，研究的目標(biāo)已經(jīng)開始由大分子之間的相互作用，發(fā)展到蛋白跟細(xì)胞，甚至組織的相互作用研究。該團(tuán)隊目前又開發(fā)出第一款可以實時定量蛋白-蛋白，蛋白-細(xì)胞，蛋白-組織相互作用的LigandTracer，其中LIGANDTRACER Green 熒光標(biāo)記檢測系統(tǒng)借助專業(yè)的熒光檢測器，可以在長達(dá)幾分鐘至幾小時的時間內(nèi)，對FITC或其它類似熒光標(biāo)記配體與細(xì)胞表面受體相互作用進(jìn)行實時觀察及動力學(xué)和親和力分析研究。相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)表于Nature以及核醫(yī)學(xué)的頂級雜志。LigandTracer也成為目前唯一專業(yè)的蛋白-細(xì)胞相互作用實時分析系統(tǒng)。
實驗室常用的細(xì)胞培養(yǎng)皿放在一個傾斜的、緩慢旋轉(zhuǎn)的支架上，培養(yǎng)皿上方安裝著探測器。含有標(biāo)記蛋白的溶液加在培養(yǎng)皿底部，通過旋轉(zhuǎn)，細(xì)胞會接觸帶標(biāo)記的溶液，隨著標(biāo)記蛋白結(jié)合到細(xì)胞上，就會有清楚地波峰出現(xiàn)在實時監(jiān)測的圖像上。每次監(jiān)測得到的波峰高度可以單獨提出來分析，進(jìn)行持續(xù)觀察、分析。最終，通過比較含有不同濃度的標(biāo)記蛋白的峰的高度可以計算和推導(dǎo)細(xì)胞和蛋白相互作用的親和力大小。

這款儀器真正實現(xiàn)了在任何一個實驗室都可以實時分析蛋白-細(xì)胞相互作用。借助專業(yè)的熒光檢測器，可以在長達(dá)幾分鐘至幾小時的時間內(nèi)，對熒光標(biāo)記配體與細(xì)胞表面受體相互作用進(jìn)行實時觀察及動力學(xué)和親和力分析研究。 LED熒光激發(fā)檢測器： 藍(lán)色（488nm）-綠色（535nm）FITC檢測和其它類似的熒光基團(tuán) 黃色（590nm）-紅（632nm）羅丹明紅和類似的熒光基團(tuán) 紅色（632nm）-近紅外（670nm）Alexa Fluor和類似的熒光探針 實時監(jiān)測孵育期和漂洗后的蛋白-細(xì)胞相互作用 可進(jìn)行幾分鐘甚至幾天的長時間連續(xù)觀察 可精確觀察和記錄極易解離的蛋白互作 操作簡單，樣品用量少，無需清洗培養(yǎng)皿
主要用于基于配基-受體的相互作用、抗原-抗體相互作用的免疫學(xué)領(lǐng)域以及醫(yī)學(xué)診斷、藥物篩選、腫瘤細(xì)胞的增殖與凋亡、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面的研究。 動力學(xué)研究，如檢測抗體特異性、蛋白與細(xì)胞的結(jié)合速率、蛋白與細(xì)胞的親和-解離速率、親和力（KD常數(shù)） 靶向藥物研發(fā)、EC50 疾病治療，癌分子靶向治療藥物療效監(jiān)測，藥物分子與細(xì)胞的相互作用等等

LigandTracer優(yōu)點解析：
1.本儀器應(yīng)用定位在蛋白、細(xì)胞、組織水平上
所有的實驗結(jié)果只有到細(xì)胞、組織甚至個體水平上才能真正有說服力！
蛋白之間相互作用分析檢測方法有很多，比如SPR、QCM、RIA、IF、Microarray、ELISA、Y2H、FRET等等，但大多都是基于終點飽和法，并多次重復(fù)，無法掌握過程變化，目前能應(yīng)用于細(xì)胞與蛋白互作的，史無前例。而LigandTracer可以測定蛋白與細(xì)胞上、組織切片上蛋白之間的相互作用，且能滿足在相對低價位、實時監(jiān)測。 2.實時監(jiān)測：
實時檢測對于研究具有不同動力學(xué)的蛋白相互作用具有很強(qiáng)的指導(dǎo)意義，實時數(shù)據(jù)提供了可靠的孵育時間和洗脫時間，大大降低了實驗的盲目性和不確定性，甚至避免了錯誤的實驗結(jié)果；同時在醫(yī)藥研發(fā)、藥物篩選中也起到很好的比對結(jié)果，大大縮短了藥物篩選的時間。 3.不僅能測親和力，還能夠?qū)崟r反映動力學(xué)過程，無需反應(yīng)達(dá)到平衡：
目前傳統(tǒng)的測定Affinity主要是靠達(dá)到動態(tài)平衡后加入的濃度推斷，即終點法測定。然而，不同類型的結(jié)合方式或動力學(xué)不同（如fast on- fast off和slow on- slow off）可能會導(dǎo)致差異很大的結(jié)果，孵育時間、沖洗時間均是很大的影響因素。對于fast on- fast off類型的蛋白互作來說，它可能在短時間內(nèi)即達(dá)到平衡后不久開始解離，但若孵育時間長可能會在洗脫過程之前就開始解離、當(dāng)洗脫后可能全部已解離完畢，采用終點法測定會誤以為根本沒有結(jié)合而得出錯誤的結(jié)論；而對slow on- slow off類型來說，為達(dá)到動態(tài)平衡往往需要數(shù)小時甚至數(shù)天，但因曲線趨勢變化很微弱，往往會被實驗者誤以為已經(jīng)達(dá)到平衡；如果單獨靠進(jìn)一步延長孵育時間，又存在抗體蛋白被細(xì)胞代謝掉的危險，從而結(jié)果也不準(zhǔn)確。 LigandTracer，摒棄傳統(tǒng)終點法測定，結(jié)合實時圖像分析即可得到準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，無需反應(yīng)達(dá)到平衡，節(jié)約時間和配體用量，同時也大大節(jié)省了人力、物力！這一點在新藥篩選方面會更加有用，如要求效果快速的安眠藥和要求藥效時間長的止痛藥方面應(yīng)用的就不應(yīng)該是同樣的動力學(xué)過程，如果有實時數(shù)據(jù)的幫助，藥物篩選效率會大大提高。 4.能夠根據(jù)實時數(shù)據(jù)推斷細(xì)胞表面受體數(shù)量，無需用飽和法測定，既節(jié)省了試劑同時結(jié)果足夠準(zhǔn)確。 5.多種型號滿足不同實驗室需求：
除了Green型儀器外，還有另外三種放射性標(biāo)記檢測的儀器Yellow/Grey/White，讓實驗人員有更多種選擇。 6.功能強(qiáng)大： （1）首家應(yīng)用于實時監(jiān)測和反映蛋白與細(xì)胞結(jié)合速率和結(jié)合保留時間 （2）使用非常方便，同時有先進(jìn)的軟件可以長至幾天的監(jiān)測和進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理 （3）KD常數(shù)的準(zhǔn)確測定，無需計數(shù)細(xì)胞、根據(jù)曲線變化即可反映結(jié)合效率等常數(shù) （4）動力學(xué)研究 （5）可以定量測定每個細(xì)胞受體數(shù)量 （6）使用范圍廣泛：一切基于抗原-抗體相互作用，配基-受體相互作用原理的實驗都可以應(yīng)用此儀器。所以在免疫學(xué)領(lǐng)域，蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域，醫(yī)學(xué)診斷、藥物篩選等核醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，以及腫瘤細(xì)胞增殖與凋亡、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等基礎(chǔ)生命科學(xué)研究領(lǐng)域都可以得到廣泛應(yīng)用。 產(chǎn)品優(yōu)勢