菌落計數(shù)器在培養(yǎng)皿上計算微生物的數(shù)目是一件非常耗時的工作。有了菌落計數(shù)器這種儀器,就不必為這項復雜的操作費心了,它可廣泛應用在每個生物實驗室中。
菌落計數(shù)的意義1、菌落是什么
菌落是指細菌在固體培養(yǎng)基上生長繁殖而形成的能被肉眼識別的生長物,它是由數(shù)以萬計相同的微生物集合而成。當樣品被稀釋到一定程度,與培養(yǎng)基混合,在一定培養(yǎng)條件下,每個能夠生長繁殖的細菌細胞都可以在平板上形成一個可見的菌落。菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理,在一定條件下培養(yǎng)后(如培養(yǎng)基成分培養(yǎng)溫度和時間、PH值、需氧性等)所取1ml(g)檢樣中所含菌落的總數(shù)。
2、菌落的危害
食品的菌落總數(shù)嚴重超標,說明其產品的衛(wèi)生狀況達不到基本的衛(wèi)生要求,將會破壞食品的營養(yǎng)成分,加速食品的腐敗變質,使食品失去食用價值。消費者食用微生物超標嚴重的食品,很容易患痢疾等腸道疾病,可能引起嘔吐、腹瀉等癥狀,危害人體健康安全。
3、菌落計數(shù)的單位
菌落形成單位叫做CFU。CFU的含義是形成菌落的菌落個數(shù),不等于細菌個數(shù)。(比如兩個相同的細菌靠得很近或貼在一起,那么經(jīng)過培養(yǎng)這兩個細菌將會形成一個菌落,此時就是2個細菌,1CFU)。
菌落計數(shù)器采用的是平板計數(shù)法,經(jīng)過培養(yǎng)后我們數(shù)出平板上所生長出的菌落個數(shù),國產菌落計數(shù)器從而計算出每毫升或每克待檢樣品中可以培養(yǎng)出多少個菌落,于是以CFU/ml或CFU/g報告之。
4、菌落計數(shù)的作用
菌落計數(shù)器可以判定食品被污染的程度,也可以用于觀察細菌對食品污染的程序,還可以用于觀察細菌在食品繁殖的動態(tài),以便對被檢樣品進行衛(wèi)生學評價時提供依據(jù)。
1、將電源插頭插入220V電源插座內。將探筆插入菌落計數(shù)器上的探筆插孔內。
2、將電源開關撥向開,計數(shù)池內燈亮。同時顯示窗內顯示明亮的,表示允許進行計數(shù)。
3、將待檢的培養(yǎng)皿底朝上放入計數(shù)池內。用探筆在培養(yǎng)皿底面對所有的菌落逐個點數(shù)。此時,菌落處被標上顏色,顯示窗內數(shù)字自動累加。
4、用放大鏡仔細檢查,確認點數(shù)無遺漏,計數(shù)即已完畢。
5、顯示窗內的數(shù)字即為該培養(yǎng)皿內的菌落數(shù)。
6、記錄數(shù)字后取出培養(yǎng)皿。按復按鈕,顯示恢復,為另一培養(yǎng)皿的計數(shù)做好準備。
菌落計數(shù)器的計數(shù)原則菌落計數(shù)器基本操作一般包括:樣品的稀釋→傾注平皿→培養(yǎng)48小時→計數(shù)報告
1、培養(yǎng)到時間后,計數(shù)每個平板上的菌落數(shù)??捎萌庋塾^察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板的菌落總數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù),計算處原始樣品中每克(或每ml)中的菌落數(shù),進行報告。
2、到達規(guī)定培養(yǎng)時間,應立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù),應將平板放置于0-4℃,但不得超過24h。
3、計數(shù)時應選取菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標準要求為25~250個菌落),若有二個稀釋度均在30~300之間時,按國家標準方法要求應以二者比值決定,比值小于或等于2取平均數(shù),比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小,均以平均數(shù)報告)。
4、若所有稀釋度均不在計數(shù)區(qū)間。如均大于300,則取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。如均小于30,則以最低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告之。如菌落數(shù)有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之間,則應以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。如所有稀釋度均無菌落生長,則應按小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報告之。有的規(guī)定對上述幾種情況計算出的菌落數(shù)按估算值報告。
5、不同稀釋度的菌落數(shù)應與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個平板的菌落數(shù)應基本接近),即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少,稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,則應視為檢驗中的差錯(有的食品有時可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,如酸性飲料等),不應作為檢樣計數(shù)報告的依據(jù)。
6、當平板上有鏈狀菌落生長時,如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限,則應作為一個菌落計,如存在有幾條不同來源的鏈,則每條鏈均應按一個菌落計算,不要把鏈上生長的每一個菌落分開計數(shù)。如有片狀菌落生長,該平板一般不宜采用,如片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻,則可以半個平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
7、當計數(shù)平板內的菌落數(shù)過多(即所有稀釋度均大于300時),但分布很均勻,可取平板的一半或1/4計數(shù)。再乘以相應稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù)。
8、菌落數(shù)的報告,按國家標準方法規(guī)定菌落數(shù)在1~100時,按實有數(shù)字報告,如大于100時,則報告前面兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)按四舍五入計算。固體檢樣以克(g)為單位報告,液體檢樣以毫升(ml)為單位報告,表面涂擦則以平方厘米(cm2)報告。
1、菌落計數(shù)器應放置在平整牢固的試驗臺上使用。
2、點數(shù)菌落時,探筆不要過于傾斜,輕輕點下至有彈跳感時,數(shù)字即被輸入。
3、菌落計數(shù)器應防潮、防強烈震動、防直接日光曝曬、防酸堿侵蝕,用后應加防塵罩。
4、注意防止細菌培養(yǎng)物污染計數(shù)池。
5、菌落計數(shù)器及探筆均不得隨意拆卸,若發(fā)現(xiàn)故障,應請有經(jīng)驗的技術人員檢修。
6、菌落計數(shù)器使用后或放置長時間后放大鏡表面會有灰塵,選用純化水稍清洗,然后用鏡頭紙擦拭干凈待用。
2018-10-18 16:16:44 1556次 http://www.yiqi.com/daogou/detail_1141.html 熱門標簽:細胞計數(shù)器是集計數(shù)、統(tǒng)計、顯示為一體的微電腦控制的計數(shù)儀器。計數(shù)準確可靠,符合臨床檢驗血常規(guī)結果,并又初步提示分辨細菌感染或病毒感染。細胞計數(shù)器使用方便,特別適用于中、小型醫(yī)院臨床檢驗細胞分類計數(shù)。
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隨著醫(yī)療科學技術的不斷進步,細胞計數(shù)器已經(jīng)廣泛應用于各臨床醫(yī)療機構。在其為臨床提供準確可靠數(shù)據(jù)的同時,也有許多影響因素使檢測結果產生誤差,給臨床醫(yī)師的診斷和治療帶來諸多不便。
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細胞計數(shù)是細胞實驗的重要組成部分,在很多領域都有所涉及。在醫(yī)療行業(yè),檢驗科室需要對血細胞、白細胞、干細胞、淋巴細胞等進行細胞計數(shù);在疫苗生產行業(yè),要對培養(yǎng)的貼壁細胞、懸浮細胞、原代細胞等進行細胞計數(shù)。細胞計數(shù)工具的發(fā)展便引起了科技研發(fā)人員的注意,全自動細胞計數(shù)器便由此產生了。
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