酶標(biāo)儀在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用越來(lái)越普及,酶標(biāo)儀的檢定也就越來(lái)越重要。酶標(biāo)儀的檢定內(nèi)容主要包括干涉濾光片波長(zhǎng)誤差及重復(fù)性、吸光度誤差、穩(wěn)定性和重復(fù)性、儀器靈敏度、通道差異及吸光度的線性。
吸光度示值穩(wěn)定性(r)的檢定:
選用492nm波長(zhǎng)或儀器特有的專(zhuān)一波長(zhǎng),將吸光度標(biāo)稱(chēng)值為1.0A的光譜中性濾光片,平放在微孔酶標(biāo)板的空板架上,以空氣為參比,測(cè)量并記錄酶標(biāo)儀的初始吸光度示值(A0),5min、10min后分別再測(cè)一次。吸光度示值穩(wěn)定性(r)計(jì)算:r等于后兩次吸光度示值的最大值與A0的差。
波長(zhǎng)示值誤差和波長(zhǎng)重復(fù)性的檢定:
從酶標(biāo)儀取出儀器所用有標(biāo)稱(chēng)波長(zhǎng)(λ)的干涉濾光片(405,450,492,620nm),使用波長(zhǎng)示值誤差優(yōu)于±0.5nm的分光光度計(jì),將干涉濾光片用1mm左右銅或鋁金屬絲懸掛固定于分光光度計(jì)比色杯架第二孔右外側(cè),干涉濾光片平面需與入射光束垂直。以1nm的改變幅度,從低到高,檢測(cè)各干涉濾光片在(±20)nm范圍內(nèi)的透射比,繪制波長(zhǎng)一透射比特性曲線,求出峰值波長(zhǎng)(λi),每片干涉濾光片重復(fù)檢測(cè)三次并求峰值波長(zhǎng)均值。
干涉濾光片波長(zhǎng)示值誤差(△λ)計(jì)算:△λ=峰值波長(zhǎng)均值-λ;波長(zhǎng)重復(fù)性(δλ)計(jì)算:δλ等于三次檢測(cè)峰值波長(zhǎng)最大值和最小值之差。
吸光度示值誤差的檢定:
先將吸光度標(biāo)稱(chēng)值(A)分別為0.2,0.5,1.0,1.5的四塊光譜中性濾光片(分光光度計(jì)附件),在分光光度計(jì)上依次選用405,450,492,630nm波長(zhǎng)或酶標(biāo)儀特有的專(zhuān)一波長(zhǎng),以空氣為參比,檢測(cè)光譜中性濾光片的吸光度。每個(gè)濾光片每個(gè)波長(zhǎng)檢測(cè)三次,取均值作為該片在該波長(zhǎng)下的吸光度標(biāo)準(zhǔn)值(As)。然后,將四塊光譜中性濾光片同時(shí)平放在微孔酶標(biāo)板的空板架上,以空氣為參比,酶標(biāo)儀連續(xù)測(cè)量3次,依次記錄儀器吸光度示值,并計(jì)算平均值(Ax)。
吸光度示值誤差(△A)計(jì)算:△A=Ax-As,取計(jì)算后的所有△A中的誤差最大值作為該酶標(biāo)儀的吸光度示值誤差。
吸光度重復(fù)性的檢定:
按吸光度示值計(jì)算的方法將吸光度標(biāo)稱(chēng)值(A)為0.5或1.0光譜中性濾光片,以空氣為參比,于酶標(biāo)儀微孔酶標(biāo)板的空板架某一固定孔位重復(fù)測(cè)定6次(n),記錄每一次吸光度(Xi),求吸光度均值,按下式計(jì)算RSD偏差值(RSD),以RSD表示儀器吸光度重復(fù)性。
靈敏度檢定:
選用450nm波長(zhǎng)或儀器特有的專(zhuān)一波長(zhǎng),使用量程適合并檢定合格的A級(jí)加樣器,在未包被的空板條某一孔加入200μl含鉻量為5mg/L的重鉻酸鉀溶液,測(cè)量并記錄吸光度值(Am),此吸光度值即為酶標(biāo)儀靈敏度。
通道差異檢定:
多通道酶標(biāo)儀選用450nm波長(zhǎng)或儀器特有的某一波長(zhǎng),將吸光度標(biāo)稱(chēng)值為1.0A光譜中性濾光片置于空板架上,以空氣為參比,依次檢測(cè)該濾光片在各通道的吸光度。通道差異(δA)計(jì)算:δA等于所有通道檢測(cè)吸光度中最大值和最小值的差。
線性驗(yàn)證:
將含鉻量為700mg/L的重鉻酸鉀溶液和0.05mol/L的硫酸溶液按比例(0:7,1:6,2:5,3:4,4:3,5:2,6:1,7:0)配成不同稀釋度的系列溶液共8管,每管取200μl加入未包被的空板條微孔,以450nm/630nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)吸光度,重復(fù)測(cè)定兩次取均值,進(jìn)行回歸分析,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)估計(jì)誤差(Sy,x)。
檢定結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn):
參照計(jì)量性能要求,酶標(biāo)儀檢定結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)為示值穩(wěn)定性(A)±0.005;波長(zhǎng)示值誤差(nm)±3;波長(zhǎng)重復(fù)性(nm)±1.5;吸光度示值誤差(A)±0.03;吸光度重復(fù)性(%)≤1.0;靈敏度(L/mg)≥0.006;通道差異(A)≤0.03(單通道酶標(biāo)儀無(wú)此項(xiàng)要求);線性±2.0%。
酶標(biāo)儀檢定對(duì)使用的設(shè)備、材料等都有具體而嚴(yán)格的要求,保證檢定結(jié)果的準(zhǔn)確可信。酶標(biāo)儀檢定工作的主要條件是實(shí)驗(yàn)室必須具備一臺(tái)經(jīng)計(jì)量部門(mén)檢定達(dá)I級(jí)合格的分光光度計(jì),且附件配有完好的光譜中性濾光片,這對(duì)吸光度的誤差檢定非常重要,因?yàn)榉止夤舛扔?jì)和酶標(biāo)儀比色角度的不同,只能通過(guò)光譜中性濾光片檢定吸光度誤差。
酶標(biāo)儀的自檢是對(duì)儀器性能狀態(tài)的評(píng)價(jià),也為儀器的維護(hù)、維修及配件的更換提供依據(jù),是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證的基礎(chǔ),具有性能優(yōu)良分光光度計(jì)的臨床實(shí)驗(yàn)室可進(jìn)行酶標(biāo)儀的自檢。
2018-11-08 11:07:46 1594次 http://www.yiqi.com/daogou/detail_1431.html 熱門(mén)標(biāo)簽:洗板機(jī)洗滌的目的是將固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他多余的游離反應(yīng)物質(zhì)分開(kāi)。即洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì),經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。
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生化分析儀又叫生化儀,屬于光機(jī)電一體化臨床生化與病理檢驗(yàn)設(shè)備,由樣品器、取樣裝置、反應(yīng)池或反應(yīng)管道、保溫器、檢測(cè)器、微處理器、打印機(jī)、功能監(jiān)測(cè)器等組成。
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血?dú)夥治鰞x是用于判斷分析患者機(jī)體的呼吸和代謝功能的儀器。血?dú)夥治隹珊饬炕颊咚釅A平衡狀況、血液氣體含量,有助于對(duì)呼吸狀態(tài)進(jìn)行全面精確的分析判斷,為危重患者的診斷、治療提供可靠依據(jù)、是危重患者監(jiān)測(cè)內(nèi)容的重要指標(biāo)。
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尿液分析儀是測(cè)定尿中某些化學(xué)成分的自動(dòng)化儀器,它是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室尿液自動(dòng)化檢查的重要工具,此種儀器具有操作簡(jiǎn)單、快速等優(yōu)點(diǎn)。
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血細(xì)胞分析儀是廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域的血液檢測(cè)儀器,能檢測(cè)出血液參數(shù)中紅白細(xì)胞總數(shù)、血小板和血紅蛋白等多種血液項(xiàng)目,并通過(guò)計(jì)算給出各細(xì)胞相關(guān)參數(shù),得出來(lái)的參數(shù)能為醫(yī)生診斷和治療患者提供有效依據(jù),是臨床檢驗(yàn)科室使用率最高的常規(guī)設(shè)備之一。
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滲透壓儀在醫(yī)藥、衛(wèi)生領(lǐng)域應(yīng)用十分廣泛。在制作注射針劑、滴眼液等藥物時(shí),必須考慮藥劑的滲透壓,滲透壓過(guò)高或過(guò)低將會(huì)導(dǎo)致人體細(xì)胞干死或細(xì)胞壁破裂等嚴(yán)重后果。
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血液融漿機(jī)也稱(chēng)恒溫解凍儀、血液化漿機(jī)等。分水浴式,普通干式,全自動(dòng)干式三種,其中全自動(dòng)干式血液融漿機(jī)最為暢銷(xiāo)。
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