移液器(微量加樣器)最早出現(xiàn)于1956年,由德國(guó)生理化學(xué)研究所的科學(xué)家Schnitger發(fā)明,其后,在1958年德國(guó)Eppendorf公司開(kāi)始生產(chǎn)按鈕式微量加樣器,成為世界上第一家生產(chǎn)微量加樣器的公司。這些微量加樣器的吸液范圍在1—1000m1之間,適用于臨床常規(guī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室使用。
移液器發(fā)展到今天,不但加樣更為精確,而且品種也多種多樣,如微量分配器、多通道微量加樣器等,其加樣的物理學(xué)原理有下面兩種:①使用空氣墊(又稱活塞沖程)加樣;②使用無(wú)空氣墊的活塞正移動(dòng)(positive
displacement)加樣。
活塞沖程(空氣墊)加樣器可很方便地用于固定或可調(diào)體積液體的加樣,加樣體積的范圍在小于1ul至lOml之間。加樣器中的空氣墊的作用是將吸于塑料吸頭內(nèi)的液體樣本與加樣器內(nèi)的活塞分隔開(kāi)來(lái),空氣墊通過(guò)加樣器活塞的彈簧樣運(yùn)動(dòng)而移動(dòng),進(jìn)而帶動(dòng)吸頭中的液體,死體積和移液吸頭中高度的增加決定了加樣中這種空氣墊的膨脹程度。
因此,活塞移動(dòng)的體積必須比所希望吸取的體積要大約2%~4%,溫度、氣壓和空氣濕度的影響必須通過(guò)對(duì)空氣墊加樣器進(jìn)行結(jié)構(gòu)上的改良而降低,使得在正常情況下不至于影響加樣的準(zhǔn)確度。一次性吸頭是本加樣系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分,其形狀、材料特性及與加樣器的吻合程度均對(duì)加樣的準(zhǔn)確度有很大的影響。
以活塞正移動(dòng)為原理的加樣器和分配器與空氣墊加樣器所受物理因素的影響不同,因此,在空氣墊加樣器難以應(yīng)用的情況下,活塞正移動(dòng)加樣器可以應(yīng)用,如具有高蒸汽壓的、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm3的液體;又如在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測(cè)定中,為防止氣溶膠的產(chǎn)生,最好使用活塞正移動(dòng)加樣器。
活塞正移動(dòng)加樣器的吸頭與空氣墊加樣器吸頭有所不同,其內(nèi)含一個(gè)可與加樣器的活塞耦合的活塞,這種吸頭一般由生產(chǎn)活塞正移動(dòng)加樣器的廠家配套生產(chǎn),不能使用通常的吸頭或不同廠家的吸頭。
移液器的工作原理是活塞通過(guò)彈簧的伸縮運(yùn)動(dòng)來(lái)實(shí)現(xiàn)吸液和放液。在活塞的推動(dòng)下,排出部分空氣,利用大大氣壓吸入液體,再由活塞推動(dòng)空氣排出液體。因此,使用移液器時(shí),配合彈簧的伸縮特性來(lái)操作,可以很好地控制移液的速度和力度。
移液器一般由數(shù)十個(gè)部件組成,多數(shù)是塑料部件。對(duì)于使用者而言,通常關(guān)注幾個(gè)容易了解且比較重要的部件:
比較容易理解的是這一部分需要耐腐蝕、耐磨損,而容易被忽視的是這一部分需要很低的熱傳導(dǎo)性:如果手握持移液器的時(shí)間較長(zhǎng),有可能通過(guò)槍體把手溫傳導(dǎo)到內(nèi)部的部件上,從而使移液器的內(nèi)腔溫度升高,氣壓增大,從而影響移液器的精度。這個(gè)部件目前基本上都是用塑料,其中比較好的是PVDF(聚偏氟乙烯)。
除了耐腐蝕外,還需要:其一,耐磨損。套柄的下端需要不斷與吸頭發(fā)生摩擦;其二,耐沖擊。在國(guó)內(nèi),由于大多數(shù)情況下用質(zhì)量較差的吸頭,在裝吸頭時(shí)需要用較大的力。為了解決這兩個(gè)問(wèn)題,有的品牌在其套柄的下端甚至整個(gè)套柄使用了金屬材質(zhì);有的品牌則在設(shè)計(jì)上下功夫,減少套柄與吸頭的摩擦并減少裝吸頭的用力,這樣對(duì)套柄材質(zhì)的要求就降低了。
目前最常用的材質(zhì)有三種:一是不銹鋼。不銹鋼的機(jī)械加工性能較好,容易實(shí)現(xiàn)密封,并且強(qiáng)度高,不易變形,能保證非常高的精度,是高端移液器的普遍選擇。但不銹鋼也有缺點(diǎn),那就是耐腐蝕性較差。因此,不銹鋼活塞對(duì)日常的使用和保養(yǎng)要求較高;二是塑料。塑料容易成型且成本低廉,低端移液器上使用比較普遍。同時(shí),塑料也有很大的缺點(diǎn),就是容易變形,很難保持較高的密封性,從而降低了移液器的精度。
三是陶瓷。陶瓷的突出特點(diǎn)是耐腐蝕,但加工較困難,活塞表面無(wú)法做到象不銹鋼那樣平滑,因此要保持密封離不開(kāi)潤(rùn)滑劑的幫助。并且,如果用作小量程移液器的活塞,由于直徑過(guò)小,機(jī)械強(qiáng)度會(huì)較差;除了以上兩種,市場(chǎng)上還有一些特殊的材質(zhì): 比如玻璃。玻璃耐腐蝕且表面平滑,但表面不耐磨,容易出現(xiàn)劃痕,且損壞后極難修復(fù)??傮w上來(lái)說(shuō),不銹鋼活塞的精度最高,塑料活塞的最低。
因?yàn)槊芊馊赡軙?huì)受到各種化學(xué)介質(zhì)的“攻擊”,且對(duì)密封性的影響很大,需要保持較長(zhǎng)的青春,所以最好是用PTFE(聚四氟乙烯)等耐腐蝕、不易變形的材質(zhì)。
現(xiàn)在市面上的移液器種類很多,主要分為手動(dòng)移液器和電動(dòng)移液器,用的多的還是手動(dòng)移液器,然而移液器的模式也是很多的,移液器模式不同那么它的功能也就有所差異,移液器的模式大致分為以下幾類:
(1)樣品混勻模式,
(2)反向吸液模式,該模式專為吸高黏度,高蒸汽壓或發(fā)泡液體所設(shè)計(jì)。
(3)電泳上樣模式,以設(shè)定的移液量會(huì)以較快可調(diào)的速度進(jìn)行吸液,然后以較慢的速度進(jìn)行排液,以免擴(kuò)散。該模式在1000ul量程移液器時(shí)。
(4)分級(jí)移取模式,專為連續(xù)移取液體所設(shè)計(jì),根據(jù)設(shè)定的移液次數(shù)和移液量進(jìn)行連續(xù)移取液體。
移液器可以定量轉(zhuǎn)移液體,被廣泛應(yīng)用在化學(xué)、生物等領(lǐng)域。微量加樣器的吸液范圍在1-1000~1之間,適用于臨床常規(guī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。以上就是為大家介紹的移液器的分類、工作原理、組成部件與移液模式,希望能給大家?guī)?lái)幫助。