蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）就是Western Blot。作為一種實驗方法。它常被用于分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中。生物組織樣品或者凝膠電泳處理過的細胞經(jīng)過特異性抗體著色，通過對著色的位置和著色深度的分析來使特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息獲得。

電泳

電泳時間通常為4-5個小時，40V電壓比較好，60V也能夠使用。當電泳至溴酚蘭剛跑出，就能夠使電泳終止，然后轉膜。

轉膜

1、需要1張7.3～8.6cm的NC膜或PVDF膜和6張7.0～8.3cm的濾紙用作轉一張膜的準備。由于膜會受到手上的蛋白的污染，所以一定要戴手套切濾紙和膜。將切好的NC膜或PVDF膜放在水上浸兩個小時才能夠使用。用鑷子往有超純水的平皿里放置膜，要使膜在水上漂浮。與水接觸的是膜的下層。整個膜會在毛細管作用下浸濕，如果膜浸沒在水中，就會有一層空氣膜在膜與水之間形成，如此就會對膜吸水起到阻撓作用。將濾紙、浸過的膜、一支玻棒、兩塊海綿墊、以及轉膜用的夾子放入到了加有轉移液的搪瓷盤里。

2.打開夾子，保持黑的一面水平，將一張海綿墊墊在上面，為了將里面的氣泡搟走，需要用玻棒來回搟幾遍。將三層濾紙墊在墊子，一手將濾紙固定，一手用玻棒將其中的氣泡搟去。

3、需要先撬掉玻璃板才能夠剝膠，要輕輕的反復撬兩個邊。將小玻璃板除去后，輕輕刮去濃縮膠，要防止刮破分離膠。在濾紙上要將分離膠蓋小心剝下，為了使其與濾紙對齊，用手調整，輕輕用玻棒將氣泡搟去。在膠上蓋上膜，需要將氣泡去除并且將整個膠蓋滿。將3張濾紙蓋在膜上并且將氣泡除去，zui后將另一個海綿墊蓋上。搟幾下就能夠將夾子合起。在轉移液中進行整個操作，要不斷的將氣泡搟去。由于膜兩邊的濾紙接觸后會發(fā)生短路，因此它們不能相互接觸。

4.在轉移槽中放入夾子，要使夾的白面對槽的紅面，夾的黑面對槽的黑面，電轉移時會有熱產(chǎn)生，為了對槽降溫，可以在冰水混合物中埋入轉移槽，或者將一塊冰放在槽的一邊。通常使用40V轉移3小時或60V轉移2小時，或者80V轉移1小時。

5.轉完后用1×麗春紅染液對膜染色5分鐘。然后將沒染上的染液用水沖洗掉，膜上的蛋白就能夠看到，晾干膜備用。