賽默飛Orbitrap Eclipse三合一超高分辨質(zhì)譜儀從根本上提高了定量蛋白質(zhì)組分析的靈敏度、速度和準(zhǔn)確性，以及全面定義蛋白質(zhì)形式和蛋白質(zhì)復(fù)合物的能力。HMRn（高質(zhì)量范圍MSn）、PTCR（質(zhì)子轉(zhuǎn)移電荷減少）和RTS（實(shí)時(shí)搜索）的加入是專門設(shè)計(jì)的功能，極大地提高了質(zhì)譜識(shí)別重要生物分子的能力，并在結(jié)構(gòu)上以前所未有的詳細(xì)程度對(duì)它們進(jìn)行研究。在保持Orbitrap Fusion Lumos三合一質(zhì)譜性能的基礎(chǔ)上，Eclipse提升了如下主要性能：

（1）HMRn（High Mass Range MSn，高質(zhì)量范圍MSn）：MSn多級(jí)質(zhì)譜的分子量范圍可達(dá)到8,000 Da，包括擴(kuò)展Orbitrap的m/z 至8,000和LTQ分離母離子m/z至8,000，并具有MSn（n=1~10）能力。比如使用HMRn做NativeOmics，可以用多級(jí)質(zhì)譜鑒定膜蛋白的配體，更好理解蛋白的相互作用。

（2）PTCR（Proton Transfer Charge Reduction ，質(zhì)子轉(zhuǎn)移電荷減少）離子源：全氟菲烷(PFPP) 離子，用于隨后雙級(jí)線性離子阱中的氣相離子反應(yīng)，利用質(zhì)子轉(zhuǎn)移減少母離子或子離子的多電荷態(tài)，使多電荷譜圖的質(zhì)量提高、Top-down組學(xué)的解析更容易，可以更好地揭示蛋白隱藏的特征。

（3）RTS（Real-time search實(shí)時(shí)搜索）算法軟件：提供了強(qiáng)大的數(shù)據(jù)庫功能，當(dāng)已鑒定的蛋白和初始數(shù)據(jù)庫匹配一致就標(biāo)記為不再進(jìn)行MS3，因此可有效縮短時(shí)間，提升1倍通量。在選擇已確定的母離子進(jìn)行 SPS MS3 定量時(shí)，可提高定量準(zhǔn)確性和TMT實(shí)驗(yàn)的蛋白質(zhì)組覆蓋率。

（4）雙曲面QR5 分段四極桿：增長為25 cm，并擴(kuò)大直徑，提升離子傳輸效率，并可有限選擇分離0.4 Da的母離子。

（5）具有50萬分辨率，擴(kuò)展選項(xiàng)后可達(dá)到100萬分辨率。

創(chuàng)新點(diǎn)：

Orbitrap Eclipse三合一質(zhì)譜，在Orbitrap Fusion Lumos系統(tǒng)基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化了離子傳輸系統(tǒng)，能夠提供前所未有的分析深度，旨在解決生物學(xué)研究中最具挑戰(zhàn)性的分析難題。從根本上提高了蛋白質(zhì)定量分析的靈敏、速度和準(zhǔn)確，以及全面定義蛋白質(zhì)以及復(fù)合物的能力。 1. 采用QR5雙曲面分段四極桿，最小隔離窗口可達(dá)0.4Da； 2. 改進(jìn)的雙壓線性離子阱質(zhì)量分析器：前部延長的高壓阱，實(shí)現(xiàn)高效率的捕集、快速冷卻和裂解離子，用于改善ETD和PTCR反應(yīng)控制。 3．超快速掃描：Orbitrap最快掃描速度40Hz，離子阱掃描最快速度45Hz。 4．新的蛋白質(zhì)組學(xué)定量方法: 實(shí)時(shí)檢索TMT定量方法可實(shí)現(xiàn)更快的數(shù)據(jù)采集，顯著提高TMT定量蛋白組學(xué)的分析性能；SureQuant定量方法用于快速精確蛋白質(zhì)組絕對(duì)定量。 5. 可選配PTCR（質(zhì)子轉(zhuǎn)移電荷降低）技術(shù)：PTCR離子源是EASY-ETD離子源的延伸，產(chǎn)生全氟菲烷（PFPP）離子，通過降低前體離子和/或碎片離子的電荷態(tài)以簡(jiǎn)化對(duì)復(fù)雜譜圖的解析，從而簡(jiǎn)化復(fù)雜的自上而下(top-down)譜圖數(shù)據(jù)。 6．選配的高質(zhì)量范圍MSn（HMRn）功能：Orbitrap m/z最大到8000，擴(kuò)大了線性離子阱隔離的質(zhì)量范圍，可對(duì)完整蛋白和蛋白質(zhì)復(fù)合體進(jìn)行全面的多種碎裂模式MSn表征。

賽默飛Orbitrap Eclipse 三合一高分辨質(zhì)譜儀