這是一種無處不在的技術(shù)。
如果你身處生命科學(xué)領(lǐng)域,你就需要用到凝膠成像系統(tǒng)。
可是聰明的你知道嗎,在更早的時候,凝膠電泳的保存是需要耗費很大精力和物力的??蒲腥藛T需要不斷重復(fù)的工作來對凝膠進行保存,以記錄辛辛苦苦得來的凝膠結(jié)果。
小編隨手從知網(wǎng)上搜索了一下關(guān)鍵詞“凝膠保存”,找到了30篇關(guān)于凝膠保存方法的期刊文獻,而這些文獻的發(fā)表時間為上世紀70年代至90年代初。(真是心疼老一輩科研工作者)
值得開心的是,自從凝膠成像儀誕生以來,科研人員已經(jīng)不再需要如此辛苦!他們可以利用現(xiàn)代化的手段快速而準確的記錄下試驗結(jié)果,并且可以方便地獲得分析和組織實驗的數(shù)據(jù)。如今,凝膠成像分析系統(tǒng)已經(jīng)不僅僅是一種凝膠記錄的手段,普遍應(yīng)用于蛋白、DNA的凝膠記錄中了,更是一種印跡分析、數(shù)據(jù)獲得的方式。
圖片來自網(wǎng)絡(luò)
采購凝膠成像系統(tǒng)的4大原則
隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,凝膠成像系統(tǒng)日趨完善,功能越來越多。選擇合適的儀器設(shè)備是實驗成功的保障,但市場上凝膠成像系統(tǒng)品類令人眼花繚亂,應(yīng)該如何選擇呢?
原則1:不選貴的,只選對的
根據(jù)實驗室研究內(nèi)容和方向,明確最常應(yīng)用的成像類型,再根據(jù)需求選擇某一特定凝膠成像系統(tǒng)。下面就實驗室最常見的一些應(yīng)用簡單說明選擇的依據(jù):
普通核酸凝膠電泳:一般此類都采用EB染色、紫外激發(fā),而且凝膠較小,推薦采用普通的凝膠成像設(shè)備即可。
西沖全自動凝膠成像系統(tǒng)XC-9160
蛋白凝膠電泳:一般此類凝膠采用考染或銀染,白光透射成像。對于小型凝膠您可以選擇一般的凝膠成像設(shè)備,但是對于大型凝膠,特別是雙向電泳凝膠,掃描成像是最好選擇。因為CCD拍照成像會有幾何扭曲,其透鏡效應(yīng)也會導(dǎo)致不同區(qū)域的信號強度差異,另外CCD拍照也無法保證不同凝膠的成像參數(shù)保持一致。
君意 JY04S-3C 凝膠成像分析系統(tǒng)
化學(xué)發(fā)光成像: 真正需要花心思考察的可能就是準備做化學(xué)發(fā)光的用戶,他們對敏感度要求高,同時還要求比較寬的動態(tài)范圍。要想捕獲到微弱的化學(xué)發(fā)光,需要很好的CCD相機和鏡頭。而化學(xué)發(fā)光是目前最常用的蛋白印跡檢測手段,冷CCD拍照成像對這種微弱的光信號是最合適的。
OmegaLum G化學(xué)發(fā)光熒光凝膠成像系統(tǒng)
熒光凝膠成像:熒光是所有這些檢測手段中最有前景的技術(shù)。這不僅僅是因為熒光染料具有最寬的動態(tài)范圍,還因為它能夠提供多通路的檢測途徑。若使用單一熒光檢測,這時凝膠成像設(shè)備的需要考慮到新的激光光源和相應(yīng)的濾光片;若需要對鄰近或重疊的目標分子進行成像,那么多通道熒光檢測就是不二之選,這時掃描成像絕對是最佳選擇。
賽默飛iBright智能成像系統(tǒng) FL1000
原則2:關(guān)鍵參數(shù)很重要
大部分成像儀的參數(shù)有幾十條,但最關(guān)鍵的就幾個。對比不同廠商的參數(shù)時,需要著重注意關(guān)鍵參數(shù),無關(guān)緊要的參數(shù)則不要太在意。
分辨率:和像素相關(guān),像素為CCD能分別的最小的感光元件,即為一個點。CCD與像素數(shù)量和像素大小也有關(guān)。
動態(tài)范圍值:動態(tài)范圍表示在一個圖像中最亮與最暗的比值?;译A12(bit)表示在一種表征光亮度的方法 ,動態(tài)范圍的值越高CCD性能越好。
量子效率:CCD的量子效率也稱像素靈敏度,指在一定的曝光量下,像素勢阱中所積累的電荷數(shù)與入射到像素表面上的光子數(shù)之比。
信噪比:化學(xué)發(fā)光檢測的時候,需要曝光的時間比較長,這樣導(dǎo)致CCD產(chǎn)生較多的暗電流,對圖像的質(zhì)量影響非常大。需要通過CCD降溫來減少影響
光學(xué)鏡頭:光學(xué)鏡頭從焦距上可分為短焦鏡頭、中焦鏡頭,長焦鏡頭;從視場大小分有廣角、標準,遠攝鏡頭;結(jié)構(gòu)上分有固定光圈定焦鏡頭,手動光圈定焦鏡頭,自動光圈定焦鏡頭,手動變焦鏡頭、自動變焦鏡頭,自動光圈電動變焦鏡頭,電動三可變(光圈、焦距、聚焦均可變)鏡頭等。
濾光鏡片:要根據(jù)具體的激發(fā)光源和濾鏡來決定。
原則3:儀器操作安全性
安全性是用戶考慮的一大問題。由于涉及到EB和各種DNA染料的因素,操作過程會否對操作者本身或者操作環(huán)境造成污染,這是需要考量的。
原則4:廠商售后或增值服務(wù)
良好的售后,是儀器制造商重要的軟實力。
你購買的不只是一臺儀器,更是這臺儀器附加的服務(wù)。儀器使用中,難免會因為儀器運行時間久、個人操作不當(dāng)?shù)瘸霈F(xiàn)問題,這時廠家能夠提供及時的技術(shù)支持或技術(shù)指導(dǎo)格外重要。
以上是小編幫你總結(jié)的凝膠成像系統(tǒng)采購原則,對你的決策有幫助嗎?
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