中藥發(fā)展幾千年，如今已在世界各地廣泛使用。近年來，隨著人們用藥安全意識的普遍提升，中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不一致、臨床安全性及有效性的不穩(wěn)定性和不確定性越來越受到被行業(yè)內(nèi)外詬病。而各種分析技術(shù)的快速發(fā)展，極大的推動了中藥質(zhì)量控制的進(jìn)步。

在上一篇文章《中藥質(zhì)量控制中的科學(xué)儀器——色譜、光譜篇》中，小編對中藥質(zhì)量控制中應(yīng)用到的色譜和光譜技術(shù)及相關(guān)儀器進(jìn)行了梳理盤點(diǎn)，本文中，將從核磁共振波譜技術(shù)、質(zhì)譜及其聯(lián)用技術(shù)和DNA分子標(biāo)記技術(shù)等幾種重要分析技術(shù)進(jìn)行梳理。

中藥質(zhì)量控制之核磁共振波譜

核磁共振最主要的應(yīng)用是通過物理方法測定化合物的分子結(jié)構(gòu)，而中藥有效性的物質(zhì)基礎(chǔ)研究是中藥質(zhì)量控制中的重要環(huán)節(jié)。利用核磁共振技術(shù)能夠獲得中藥中有效成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

除單獨(dú)利用核磁共振技術(shù)，HPLC-NMR聯(lián)用技術(shù)也被應(yīng)用到中藥質(zhì)量控制中。通過該聯(lián)用技術(shù)，能夠?qū)崿F(xiàn)色譜分離和波譜結(jié)構(gòu)鑒定連續(xù)進(jìn)行，避免了傳統(tǒng)分析方法中，先分離純化再進(jìn)行鑒定從而浪費(fèi)時間及人力物力的問題。

技術(shù)類型

技術(shù)原理

應(yīng)用方向

應(yīng)用舉例

NMR技術(shù)

通過化學(xué)位移值、譜峰多重性 、偶合常數(shù)值、譜峰相對強(qiáng)度和在各種二維譜及多維譜中呈現(xiàn)的相關(guān)峰，提供分子中原子的連接方式   、空間的相對取向等定性的結(jié)構(gòu)信息。

（1）結(jié)合其他分析手段如質(zhì)譜對化合物進(jìn)行定性分析
  （2）1H 核磁共振波譜適用于定量分析

（1）崖藤生物堿的碳譜和氫譜全歸屬
  （2）預(yù)測青蒿素分子的核磁共振碳譜和氫譜
  （3）根據(jù)有無原小檗堿型生物堿的特征峰，鑒別黃連與黃連偽品

中藥質(zhì)量控制之質(zhì)譜及其聯(lián)用技術(shù)

質(zhì)譜主要用于分析鑒定天然產(chǎn)物中提取的化合物，有機(jī)質(zhì)譜能夠給出有機(jī)化合物的分子量、分子式及碎片離子裂解方式和有機(jī)分子結(jié)構(gòu)類型規(guī)律等信息。因質(zhì)譜及其聯(lián)用技術(shù)在物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒方面功能強(qiáng)大，被廣泛應(yīng)用于多種中藥材的質(zhì)量控制中。

聯(lián)用技術(shù)類型

技術(shù)簡介

應(yīng)用舉例

質(zhì)譜

質(zhì)譜法可提供分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)的信息 ，定量測定可采用內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法

（1）確定朝鮮淫羊藿分離組分的化學(xué)成分
  （2）通過比較炮制烏頭與烏頭質(zhì)譜智文峰的差異，作為烏頭類中藥是否經(jīng)炮制的判斷

氣質(zhì)聯(lián)用

具有高靈敏度和強(qiáng)抗干擾能力，是分析鑒定具有揮發(fā)性成分的首選

（1）冬蟲夏草中揮發(fā)性成分鑒定
  （2）比較不同來源莪術(shù)中莪術(shù)醇等物質(zhì)的含量

液質(zhì)聯(lián)用

同事進(jìn)行多成分檢測，可通過保留時間、分子量和碎片等信息用于目標(biāo)化合物鑒別

（1)判斷東北紅豆杉及其傷愈組織粗提物中紫杉醇色譜峰歸屬
  （2）鑒定八味地黃方與人參湯共煎時產(chǎn)生的毒性物質(zhì)

毛細(xì)管電泳-質(zhì)樸聯(lián)用

多數(shù)毛細(xì)管電泳操作模式可與質(zhì)譜聯(lián)用。選擇接口時 ，應(yīng)注意毛細(xì)管電泳的低流速特點(diǎn)并使用揮發(fā)性緩沖液

粉防己甲醇提取物中的生物堿分離鑒定

超臨界流體色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

主要采用大氣壓化學(xué)離子化或電噴霧離子化接口。色譜流出物通過一個位于柱子和離子源之間的加熱限流器轉(zhuǎn)變?yōu)闅鈶B(tài)，進(jìn)入質(zhì)譜儀分析

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中藥質(zhì)量控制之DNA分子標(biāo)記技術(shù)

DNA分子標(biāo)記技術(shù)可用來比較藥材間DNA分子遺傳多樣性差異，從而鑒別藥材基源、確定學(xué)明的方法。DNA指紋圖譜技術(shù)在藥材鑒別、GAP實(shí)施、道地藥材研究、遺傳育種和種植資源研究以及中成藥質(zhì)量控制等領(lǐng)域有重要價值和廣闊的應(yīng)用前景。

目前已有研究人員利用DNA分子標(biāo)記技術(shù)對不同地區(qū)的三七進(jìn)行DNA指紋圖譜的鑒別研究，根據(jù)其遺傳特征的不同，鑒別不同地域的三七藥材。此外，有研究人員利用此技術(shù)建立起了中藥材鹿鞭的分子分類學(xué)鑒定試劑盒。

除上述技術(shù)方法外，近年來有更多先進(jìn)的分析方法也在被不斷被發(fā)展應(yīng)用，如超高效液相色譜、二維液相色譜、聯(lián)合在線鑒定技術(shù)等等，在中藥材真?zhèn)舞b別、成分分離鑒定、毒性物質(zhì)檢出等等方面，發(fā)揮重大作用。

隨著科學(xué)技術(shù)不斷提升，相應(yīng)的儀器設(shè)備更加精密、高效，色譜、質(zhì)譜、光譜、核磁共振波譜及DNA分子標(biāo)記等多種分離、分析、檢測技術(shù)共同推動中藥質(zhì)量控制的發(fā)展，確保中藥更好的履行維護(hù)人類健康的使命。

注：本文部分內(nèi)容引自

1.  蔣慶峰, 金松子, 蔡振華,等. 現(xiàn)代分析技術(shù)在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用[J]. 現(xiàn)代儀器與醫(yī)療, 2007, 13(3):1-8.

2.  馬艷芹, 張蓉蓉, 房吉祥, et al. 現(xiàn)代分析技術(shù)在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 首都醫(yī)藥, 2013(16):14-15.