MicroRNAs (miRNAs)是一種存在于真核生物的內(nèi)源性非編碼小RNA，具有抑制靶向mRNA轉(zhuǎn)錄、翻譯或者剪切靶向mRNA并促使其降解的功能。它會(huì)組裝進(jìn)入沉默復(fù)合體(RISC)，識(shí)別并與靶向mRNA互補(bǔ)配對(duì)，從而降解或者阻止mRNA翻譯。

　　miRNAs負(fù)責(zé)調(diào)控多種生理過(guò)程，包括細(xì)胞周期(發(fā)育、遷移和凋亡)、干細(xì)胞分化、免疫調(diào)節(jié)、代謝控制、神經(jīng)發(fā)育、病毒復(fù)制等等。這意味著，它與多種疾病有關(guān)聯(lián)。miRNAs存在于許多常用組織樣本中，包括血漿、血清、唾液以及尿液，且高度穩(wěn)定，可以作為生物標(biāo)記物用于多種疾病的診斷，例如癌癥、神經(jīng)性衰退疾病、心血管疾病和自身免疫性疾病。

　　此外，相比于其他生物分子，miRNAs更具有組織特異性，且能夠穿過(guò)血腦屏障，從而可以成為檢測(cè)大腦健康的生物標(biāo)記物，用于檢測(cè)多種神經(jīng)類疾病，包括多發(fā)性硬化癥、阿爾茲海默癥和帕金森癥。

　　基于上述優(yōu)勢(shì)，科研機(jī)構(gòu)以及醫(yī)藥企業(yè)開(kāi)始轉(zhuǎn)向開(kāi)發(fā)基于miRNAs的檢測(cè)技術(shù)和服務(wù)項(xiàng)目，它們能夠?yàn)榧膊≡\斷、防治提供更快捷的過(guò)程和手段。而且，這些優(yōu)勢(shì)將會(huì)推動(dòng)生命科學(xué)領(lǐng)域?qū)iRNAs檢測(cè)的需求。Kalorama Information公司最新調(diào)研報(bào)告指出，2015年全球miRNAs檢測(cè)及服務(wù)市場(chǎng)價(jià)值約達(dá)到4.07億美元。而且，根據(jù)GEN網(wǎng)站報(bào)道，基于miRNAs的檢測(cè)技術(shù)和服務(wù)至少在未來(lái)5年內(nèi)都將是一個(gè)熱門領(lǐng)域。

　　miRNAs檢測(cè)技術(shù)

　　目前，miRNAs檢測(cè)技術(shù)主要包括qRT-PCR、微陣列(microarray)、高通量測(cè)序技術(shù)(NGS)。

　　首先，定量即時(shí)聚合酶鏈鎖反應(yīng)(qRT-PCR)能夠借助熒光染劑測(cè)量每次PCR循環(huán)后擴(kuò)增的核酸總量。但是它在靈敏度、重復(fù)性等方面存在局限性。

　　而微陣列則是實(shí)現(xiàn)基因表達(dá)信息快速檢測(cè)的重要技術(shù)，具有易于操作、成本較低、準(zhǔn)確率提高等優(yōu)點(diǎn)，適用于大規(guī)模miRNAs檢測(cè)。但是它依然在靈敏度上有所欠缺，不能挖掘未知的miRNAs。但是，仍然有不少企業(yè)正在開(kāi)發(fā)miRNAs微陣列檢測(cè)技術(shù)，包括Affymetrix、Agilent、Thermo Fisher 和Illumina等等。

　　隨著測(cè)序技術(shù)、儀器、成本的更新優(yōu)化，高通量測(cè)序技術(shù)也逐漸成為量化分析miRNAs的熱門手段。包括Illumina的 MiSeq、Thermo的Ion Personal Genome Analyzer以及Ion S5 在內(nèi)的測(cè)序平臺(tái)讓miRNAs大樣本分析變得更易實(shí)現(xiàn)。

　　NGS的優(yōu)勢(shì)在于測(cè)序通量大、靈敏度高、重復(fù)性好，且能夠檢測(cè)未知基因，提供定量定性分析等等。但是，它在miRNAs分析應(yīng)用上依然存在缺陷，例如樣本制備標(biāo)準(zhǔn)高、定量準(zhǔn)確性不高、成本相對(duì)較高、復(fù)雜性增強(qiáng)以及儀器、試劑、數(shù)據(jù)分析軟件涉及不同的供應(yīng)商增加了工作流程的繁瑣性。特別是，針對(duì)miRNAs分析的樣本制備需要遵循特定的步驟，以減少引物二聚體的形成。

　　miRNAs功能研究

　　“miRNA Mimics”、“miRNA inhibitor”是研究miRNAs功能的典型“工具包”。

　　其中，“miRNA Mimics”是一種通過(guò)化學(xué)修飾寡核苷酸的方法合成而來(lái)的能夠模擬生物內(nèi)源miRNAs的小RNA分子。它會(huì)進(jìn)一步增強(qiáng)內(nèi)源性miRNA的沉默功能，從而降低蛋白質(zhì)表達(dá)，進(jìn)行功能獲得性(gain-of-function)研究。

　　而“miRNA inhibitor”同樣也是化學(xué)合成而來(lái)，它可以特異地靶向和敲除單個(gè)miRNA分子，從而削弱內(nèi)源miRNA的基因沉默效應(yīng)，提高蛋白表達(dá)量，進(jìn)行功能缺失性(loss-of-function)研究。

　　Mimics 和inhibitors實(shí)驗(yàn)可以同時(shí)進(jìn)行驗(yàn)證miRNA的生物學(xué)功能。目前，包括Thermo、Dharmacon、Exiqon、Integrated DNA Technologies、Qiagen、MilliporeSigma在內(nèi)的多家公司都在開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)miRNA功能驗(yàn)證試劑盒。

　　miRNA檢測(cè)技術(shù)和服務(wù)市場(chǎng)分析

　　隨著基礎(chǔ)研究的深入、應(yīng)用技術(shù)的創(chuàng)新、臨床轉(zhuǎn)化的推廣，miRNA分析及服務(wù)依然是一個(gè)充滿活力和前景的行業(yè)。眾多生物科技公司在該領(lǐng)域布局，承擔(dān)著不同產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)，包括miRNA特定qRT-PCR 試劑、微陣列、生物標(biāo)記試劑、NGS文庫(kù)構(gòu)建盒、功能驗(yàn)證試劑盒等。

　　該領(lǐng)域的領(lǐng)頭軍隊(duì)包括Thermo Fisher、Exiqon、Dharmacon、Qiagen、Illumina。市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力主要依賴于產(chǎn)品的質(zhì)量和性能，所以產(chǎn)品或者技術(shù)是否能夠滿足科研、臨床應(yīng)用至關(guān)重要。