每當(dāng)遇到關(guān)于糖類和糖醇的分析,大家可能馬上會想到樹脂基質(zhì)色譜柱。其憑借配位體交換模式對糖類分離的優(yōu)越選擇性和穩(wěn)定性,在多種糖類分析中,表現(xiàn)出色。
糖的種類不同,羥基的立體構(gòu)象也不同。如下圖所示,具有ax-eq-ax結(jié)構(gòu)(Triplet)的糖與金屬離子的絡(luò)合作用力,比羥基ax-eq(Pair)結(jié)構(gòu)的糖與金屬離子的絡(luò)合力強(qiáng),絡(luò)合相互作用力根據(jù)金屬離子種類的不同而不同。
樹脂基質(zhì)色譜柱的配位體交換模式即是利用羥基與金屬離子形成絡(luò)合體的相互作用(配位體交換能)來分離。
近期我們接到一些客戶反映,安捷倫PL1170-6830樹脂基質(zhì)色譜柱,使用的流動相是0.0005M的硫酸,一開始流速1.0ml/min,柱壓為4.5Mpa,用到第三天,柱壓突然飆升,流速0.6ml/min,壓力已為4.9Mpa。這是什么原因呢?
后來溝通了解到,原來是在一次使用中,用shutdown程序,沒注意關(guān)機(jī)程序中的流動相是乙腈,點(diǎn)關(guān)機(jī)程序后才發(fā)現(xiàn)用的是100%乙腈作流動相0.2ml/min,重新?lián)Q回0.005M硫酸作流動相后,0.6ml/min,壓力就達(dá)到4.8-4.9Mpa了。有什么方法恢復(fù)呀?
遇到這種情況,我們只能建議按照原色譜柱使用說明書的清洗方法沖洗柱子,能減少柱壓,但是估計不可能100%恢復(fù)。沖洗后如果還不能滿足使用要求,可以倒著試試。如果還不行,就要購買新的色譜柱了。
什么?
就一個小失誤,用錯了一次流動相?
價格近萬的色譜柱就無法恢復(fù)了?
是的!因為樹脂基質(zhì)的色譜柱,流動相改變會造成樹脂溶脹,柱效會下降,壓力會升高。這種柱子基本不會用乙腈和甲醇等有機(jī)溶劑,如果一定要用,也只能最多10%的濃度。
像以上客戶用了100%的乙腈溶劑,清洗的后柱壓能減少,但是基本不可能完全修復(fù)。
為了讓大家實(shí)驗中避免發(fā)生這種情況,小編羅列了常見的樹脂基質(zhì)色譜柱,用下列色譜柱做實(shí)驗的時候一定要注意流動相哦~
記?。簶渲|(zhì)色譜柱盡量不要用乙腈和甲醇等有機(jī)溶劑??!如果一定要用,也只能最多10%的濃度。
Lubex :
Ecosil?sugar?H+?
Agilent :
MetaCarb?64H ; MetaCarb?67H; MetaCarb?87H ; MetaCarb?USP?L17 ; PL?Hi-Plex?H
Waters? :
Fast?Fruit?Juice ; Hamilton?HC-75H ; Hamilton?PRP-X200 ; Hamilton?PRP-X300 ; IC-Pak?Cation ; IC-Pak?Ion?Exclusion ;
Shodex :
Shodex?IC?Y-521 ; Shodex?RSpak?KC-811 ; Shodex?SUGAR?SH1011 ; Shodex?SUGAR?SH1821
Grace?-?Alltech :
Alltech?IOA-1000 ; Alltech?IOA-2000 ; Alltech?OA-1000 ; Alltech?OA-2000 ; IC?Wescan?Anion ; Wescan?Anion?Exclusion
BIO-RAD?Laboratories :
Aminex?Fast?Acid?Analysis ; Aminex?HPX-87H?
Thermo?Scientific :
HyperREZ?XP?Carbohydrate?H
; HyperREZ?XP?Organic?Acids
Jordi?Labs?LLC :
Jordi?Gel?DVB?Sulfonated?SCX
; Jordi?Gel?DVB?Sulfonated?SCX?Resin ; Jordi?Sulfonated?Polar?Pac?SCX
Mitsubishi?Chem?Corp
:
MCI?GEL?CK08EH
Macherey-Nagel
:
Nucleogel?ION?300?OA
; Nucleogel?Sugar?810H
PerkinElmer
:
Polypore?H
Hamilton
:
PRP-X200
Phenomenex
:
Rezex?RFQ-Fast?Acid
; Rezex?RHM-Monosaccharide ; Rezex?ROA-Organic?ACid
Shimadzu
:
Shim-pack?SCR-101H
Supelco :?
SUPELCOGEL?C-610H
; SUPELCOGEL?H
TOSOH
:
TSK-GEL?Aminopak
Shinwa
:
Ultron?PS-80H
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