微生物的酶PH測(cè)定水解反應(yīng)-實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)業(yè)顯微鏡

人們把在特定條件下～分鐘內(nèi)可催化1微克分子的底物轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物
所需要的酶量定為i個(gè)酶活力單位。特定條件包括pH值、底物的濃度和
溫度。曾經(jīng)提出了各種標(biāo)準(zhǔn)溫度，但實(shí)際上所用的溫度是根據(jù)所研究的
酶的生物來(lái)源而定的。因此通常是在37℃測(cè)定取自溫血?jiǎng)游锏拿?，而?br>以在較低的溫度(如25℃)下測(cè)定取自微生物的酶。以醇脫氫酶為例，知
道了1克分子的NADH溶液的光吸收，那么就能得到單位時(shí)間內(nèi)NADH形成
的量，因此也就得出了酶活力的單位數(shù)。

在水解酶的研究中，大多是利用從鄰位和對(duì)位硝基苯酚衍生來(lái)的合
成底物
pH測(cè)定：許多反應(yīng)，特別是水解反應(yīng)，可產(chǎn)生酸性產(chǎn)物。芳基硫酸
酯酶產(chǎn)生硫酸，所以這個(gè)反應(yīng)在非緩沖溶液中可用一靈敏的pH計(jì)來(lái)追蹤
。在這種方式中所用的技術(shù)固有的不利之處是pH經(jīng)常在變化，而這點(diǎn)進(jìn)
而就很可能影響對(duì)PH的改變敏感的酶活力。為了克服這一點(diǎn)，已制造出
一種稱(chēng)為pH穩(wěn)定計(jì)的儀器，這種儀器可以監(jiān)控PH，在適當(dāng)時(shí)候加入酸或
堿，以保持pH恒定，并按時(shí)記錄加入的量。

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