測壓技術(shù)可測定細胞勻漿攝取的氧產(chǎn)生的二氧化碳
測壓法:這種技術(shù)常用來研究呼吸作用,即由細胞勻漿所攝取的氧
并同時產(chǎn)生的二氧化碳??梢詼y定一定容量下反應(yīng)系統(tǒng)壓力的變化,而
且經(jīng)過適宜的裝置也能計算氧吸收和放出的二氧化碳。這種直接的測定
方法只限于用來研究個別一些酶,因為只有極少數(shù)情形才有氣體的攝取
或放出。這種技術(shù)可以擴大到用來研究因反應(yīng)系統(tǒng)中含有碳酸氫鹽而產(chǎn)
生酸的反應(yīng),也可測量由于酸的作用而放出的二氧化碳。
近來,這一技術(shù)已部分被氧電極的發(fā)展所取代,氧電極是測量一個
溶液的氧張力,其方式與用氫電極來測量pH相似。
一般化學(xué)方法:在有些情況下,上述這些專門的酶測定法一個都不
能用。這時就必須利用一些普通的化學(xué)方法來追蹤底物的消失或產(chǎn)物的
出現(xiàn)。例如,測定催化磷酸酯類水解的一些酶,可采用在反應(yīng)進行一段
時間后,劇烈改變pH或加熱使酶失活來停止催化作用,然后用標(biāo)準磷酸
鹽分析法測定釋放出來的磷酸鹽,例如形成磷鉬酸鹽復(fù)合體并還原之。
同樣,催化蛋白質(zhì)水解的一些酶,可以用估計自由基團的增加來測定。
在這些情況中通常是利用化學(xué)分析的比色法,因為這些方法快速、方便
、靈敏。事實上,分光光度計已經(jīng)成為酶學(xué)家的最有價值的工具。
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