酶活力的測定

事實(shí)上是不可能直接測量任何酶的量的。理論上講，如果一種酶含
有某些罕見的和特異的特點(diǎn)，譬如金屬離子，那么測定那一特點(diǎn)就是測
量出了酶的量。然而，這是假設(shè)在這個(gè)系統(tǒng)中除含有金屬離子外不存在
其他任何組分。并且除非是最純的酶制劑，否則這種假設(shè)對(duì)所有的酶來
說都是不能證實(shí)的。因此直接測定酶的方法沒有普遍的應(yīng)用價(jià)值。

酶通常是通過它們的催化活力來測定的，即測定酶所催化的反應(yīng)的
速率并與未被酶催化的反應(yīng)速率相比較。就大多數(shù)反應(yīng)來說，未被催化
的反應(yīng)速率是非常低的，并且對(duì)所有的實(shí)用目的來說可以忽略。然而必
須指出，在任何給定的一系列實(shí)驗(yàn)條件下，在用這種近似法以前速率要
低。

測定酶促反應(yīng)的方法就象已知的酶促反應(yīng)的數(shù)目一樣，也是各種各
樣的。然而，可以看出某些實(shí)驗(yàn)技術(shù)的適用范圍是很廣的。

分光光度法：如果在底物向產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化中，在紫外光和可見光光譜
范圍內(nèi)，反應(yīng)系統(tǒng)的光吸收性質(zhì)有某些特異的和適當(dāng)大的變化的話，那
么這種變化就可以利用來追蹤這個(gè)反應(yīng)。在追蹤NAD是輔酶的反應(yīng)中，
此項(xiàng)技術(shù)特別有用。NAD和NADH=者的最大吸收峰都在260毫微米，而在
這個(gè)波長時(shí)二者等克分子溶液的吸收之間僅有一個(gè)小的百分率差別。然
而，NADH在340毫微米還有一個(gè)吸收峰，NAD在這個(gè)波長的吸收則微不足
道。所以可以通過測量醇和NAD的合適溶液在340毫微米處的光吸收來研
究醇脫氫酶。在一個(gè)給定的時(shí)刻加入一定量的酶，每15秒的間隔測定一
下這個(gè)系統(tǒng)的光吸收，共測3分鐘。光吸收的增長率即是形成的NADH的
量，也就是所催化的反應(yīng)的速率的度量。

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