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小國(guó)中山大學(xué)膠囊光電關(guān)聯(lián)性電子顯微鏡掃描關(guān)鍵技術(shù)取得成功驗(yàn)證大腦動(dòng)作電位超微結(jié)構(gòu)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2021-06-23  來(lái)源:儀器網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):52
核心提示:2018年2月7日,國(guó)際學(xué)術(shù)期刊—美國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊《Journal of Neuroscience》以封面形式報(bào)道了中國(guó)科大微尺度物質(zhì)科學(xué)國(guó)家研究中心與生命科學(xué)學(xué)院畢國(guó)強(qiáng)、劉北明與周正洪教授合作課題組的研究成果—利用冷凍電子斷

 

  2018年2月7日,國(guó)際學(xué)術(shù)期刊—美國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊《Journal of Neuroscience》以封面形式報(bào)道了中國(guó)科大微尺度物質(zhì)科學(xué)國(guó)家研究中心與生命科學(xué)學(xué)院畢國(guó)強(qiáng)、劉北明與周正洪教授合作課題組的研究成果—利用冷凍電子斷層三維重構(gòu)技術(shù)(cryo-electrontomography,cryoET)與冷凍光電關(guān)聯(lián)顯微成像技術(shù)(cryo- correlative light and electron microscopy, cryoCLEM)解析神經(jīng)突觸超微結(jié)構(gòu)。

  突觸是大腦行為、意識(shí)、學(xué)習(xí)與記憶等功能的最基本結(jié)構(gòu)與功能單元,同時(shí)也是多種腦疾病發(fā)生的起源。精確解析突觸的分子組織架構(gòu),及其在神經(jīng)活動(dòng)過(guò)程中的變化被認(rèn)為是解密大腦奧妙的最直接有效的方法,也是神經(jīng)科學(xué)中最基礎(chǔ)的研究工作之一。早期,生化與分子生物學(xué)、電生理學(xué)等研究發(fā)現(xiàn)了突觸中的各種大量分子和細(xì)胞器組份,并揭示了突觸的各種功能特性和可塑性規(guī)則。然而,由于研究手段的局限,突觸中的這些不同的組件是如何組織成復(fù)雜的機(jī)器來(lái)執(zhí)行不同的功能,還遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒(méi)有充分觀察和解析。最新發(fā)展的冷凍電鏡技術(shù)(cryoEM),尤其是cryoET技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)亞細(xì)胞乃至全細(xì)胞在納米水平分辨率的三維成像,為突觸分子組織架構(gòu)的解析提供了契機(jī)。

  合作課題組利用cryoET結(jié)合自主研發(fā)的冷凍光電關(guān)聯(lián)顯微成像技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)中兩類最主要突觸-興奮性/抑制性突觸的精確區(qū)分以及結(jié)構(gòu)特征的定量化分析。通過(guò)將大鼠的海馬神經(jīng)元培養(yǎng)在冷凍電鏡的特型載網(wǎng)上,隨后進(jìn)行快速冷凍后并直接進(jìn)行CryoET/CryoCLEM成像,課題組獲得了一系列完整突觸在近生理狀態(tài)下的三維結(jié)構(gòu)。結(jié)合定量分析手段,首次報(bào)道了抑制性突觸的均勻薄片狀突觸后致密區(qū)結(jié)構(gòu),并發(fā)現(xiàn)兩類突觸中均存在橢球狀突觸囊泡,結(jié)束了關(guān)于兩類突觸在突觸囊泡和突觸后致密區(qū)形態(tài)精細(xì)結(jié)構(gòu)上的由來(lái)已久的爭(zhēng)論。進(jìn)一步,利用當(dāng)前最先進(jìn)的結(jié)合了Volta相位板、電子能量過(guò)濾器和直接探測(cè)相機(jī)的冷凍電鏡成像設(shè)備,合作課題組獲得了突觸在分子水平的精細(xì)組織架構(gòu),實(shí)現(xiàn)了在突觸原位直接觀察單個(gè)神經(jīng)遞質(zhì)受體蛋白復(fù)合物及其與支架蛋白的相互作用。

  這是當(dāng)前國(guó)際上首次利用冷凍電鏡技術(shù)對(duì)完整突觸進(jìn)行系統(tǒng)性定量分析。這一工作,一方面推動(dòng)了對(duì)突觸超微結(jié)構(gòu)與功能這一“黑匣子”的解密,另一方面為突破冷凍電鏡技術(shù)在復(fù)雜細(xì)胞體系中原位解析生物大分子復(fù)合物的組織結(jié)構(gòu)這一技術(shù)挑戰(zhàn)奠定了基礎(chǔ)。

  圖: 利用CryoET解析離體培養(yǎng)海馬神經(jīng)突觸三維結(jié)構(gòu)的三維可視化渲染(Journal of Neuroscience 2018年2月7號(hào)封面)

 
 
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