??????建立生理相關(guān)的體外模型對(duì)于進(jìn)一步了解神經(jīng)疾病的機(jī)制以及靶向藥物開(kāi)發(fā)至關(guān)重要。iPSC衍生的神經(jīng)元顯示出對(duì)化合物篩選和疾病建模的巨大希望，然而目前已經(jīng)開(kāi)發(fā)出使用三維（3D）培養(yǎng)物作為對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的測(cè)定開(kāi)發(fā)的有效方法。3D細(xì)胞培養(yǎng)被認(rèn)為是更接近人類組織的重演方式，包括結(jié)構(gòu)、細(xì)胞組織、細(xì)胞- 細(xì)胞和細(xì)胞- 基質(zhì)相互作用等領(lǐng)域。

???????3D 細(xì)胞培養(yǎng)模式較傳統(tǒng)的單層細(xì)胞培養(yǎng)模式能夠更加真實(shí)地反應(yīng)出細(xì)胞相互作用和化合物篩選過(guò)程中其生理變化的過(guò)程。采用手動(dòng)操作進(jìn)行相應(yīng)檢測(cè)分析會(huì)復(fù)雜而繁瑣，而且隨著樣品量增加變得越來(lái)越困難。自動(dòng)化系統(tǒng)能夠以更加精準(zhǔn)、更高通量的方式進(jìn)行3D 細(xì)胞成像分析，ImageXpress?Micro Confocal共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)將會(huì)成為您的得力研究助手。

???????目前，比較常見(jiàn)的的兩種3D細(xì)胞球培養(yǎng)模式包括3DProSeedTM水凝膠和微流控OrganoPlate?平臺(tái)培養(yǎng)系統(tǒng)。水凝膠通過(guò)摻入MMP切割位點(diǎn)來(lái)幫助細(xì)胞遷移，并包含RGD細(xì)胞粘連基序以支撐細(xì)胞的粘附作用。這種水凝膠預(yù)制板使用方法簡(jiǎn)便，同時(shí)能很好地兼容自動(dòng)化設(shè)備（圖1）。OrganoPlate?是一個(gè)高通量平臺(tái)，結(jié)合了最新的3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、Phaseguides?和微流體技術(shù)，它包含96個(gè)適合長(zhǎng)期培養(yǎng)活細(xì)胞的組織芯片，適用于篩選目的，并且與標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備或自動(dòng)化系統(tǒng)兼容，如ImageXpress?Micro Confocal共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)（圖2）。

圖1：圖解3DProSeedTMsurface工作原理以及在模具中培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞的過(guò)程

圖2：OrganoPlate中培養(yǎng)的神經(jīng)元細(xì)胞。在充滿基質(zhì)膠的OrganoPlate培養(yǎng)槽內(nèi)對(duì)接種的iCell神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行透射光成像。細(xì)胞以每芯片30,000個(gè)細(xì)胞的密度培養(yǎng)72h，然后用20X平場(chǎng)熒光物鏡進(jìn)行透射光成像。

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