新舊藥典對比

關(guān)于黃芩含量的檢測的規(guī)定，原15版藥典僅需檢測黃芩苷，而20版藥典則有了新的變化，對于黃芩的檢測項(xiàng)目增加了，需檢測黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素四種物質(zhì)。

樣品制備

原2015版藥典測定黃芩苷

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）為流動相；檢測波長為280nm。理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應(yīng)不低于2500。

對照品溶液的制備：取在60℃減壓干燥4小時的黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含60 g的溶液，即得。

供試品溶液的制備：取本品中粉約0.3g，精密稱定，加70%乙醇40ml，加熱回流3小時，放冷，濾過，濾液置100ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液濾入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 l，注入液相色譜儀，測定，即得。

現(xiàn)2020版藥典測定黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素

對照品溶液的制備：取黃芩苷對照品、漢黃芩苷對照品、黃芩素對照品、漢黃芩素對照品適量，精密稱定，加 70%甲醇制成每 1ml 含黃芩苷 300 g、漢黃芩苷 80 g、黃芩素 50 g、漢黃芩素 20 g 的混合溶液，即得。 

供試品溶液的制備：取本品粉末（過4號篩）約 0.1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入 70%甲醇 50 ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率 400W，頻率 100kHz）15 分鐘，放冷，再稱定重量，用 70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 l，注入液相色譜儀，測定，即得。

色譜條件

儀器：APS-80-16PLUS智能液相色譜儀

色譜柱：APS-C18 5 m 250 4.6mm

流動相：以乙腈為流動相A，0.1%磷酸為流動相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫時間(min)流動相A(%)流動相B(%)0~1022 2578 7510~15257515~2525 3275 6825~3032 4068 6030~35406035~4040 5060 5040~4550 9550 545~50955

流速：1 ml/min

柱溫：25℃

檢測波長：276 nm

進(jìn)樣量：5 l

柱壓：107 bar

圖譜展示

對照品圖譜

供試品圖譜

結(jié)論：黃芩按照新2020版含量檢測方法檢測，供試品黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素理論塔板數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于藥典要求，且重復(fù)實(shí)驗(yàn)理論塔板數(shù)及保留時間沒有下降，故APS80-16PLUS智能液相色譜儀+APS-C18色譜柱適合用于2020版藥典黃芩檢測項(xiàng)下黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的含量分析。