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藥敏試驗中菌種的可選擇對藥敏結(jié)果的直接影響原因

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2021-03-23  來源:儀器網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):68
核心提示:藥敏試驗培養(yǎng)基的選擇具有一定的原則和要求,不以個人經(jīng)驗或愛好而更改。為了使臨床試驗和醫(yī)療保健服務(wù)水平具備一致的標(biāo)準(zhǔn),許多國家或機構(gòu)制定了不同的參照標(biāo)準(zhǔn)。由于參照標(biāo)準(zhǔn)有所差異,故藥敏培養(yǎng)基的要求也有所不同。我國藥敏試驗結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)參照美國CL

藥敏試驗培養(yǎng)基的選擇具有一定的原則和要求,不以個人經(jīng)驗或愛好而更改。為了使臨床試驗和醫(yī)療保健服務(wù)水平具備一致的標(biāo)準(zhǔn),許多國家或機構(gòu)制定了不同的參照標(biāo)準(zhǔn)。由于參照標(biāo)準(zhǔn)有所差異,故藥敏培養(yǎng)基的要求也有所不同。我國藥敏試驗結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)參照美國CLSI標(biāo)準(zhǔn)文件,則要求除了特殊菌群,K-B法所用的培養(yǎng)基必須是M-H培養(yǎng)基;英國參照的標(biāo)準(zhǔn)BSAC則要求培養(yǎng)基為ISO培養(yǎng)基,而M-H營養(yǎng)瓊脂只適用于葡萄球菌的藥敏試驗。因此在工作中,我們要嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膮⒄誄LSI,根據(jù)不同菌群的需求選擇合適、正確的藥敏培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的成分和質(zhì)量是保證藥敏結(jié)果準(zhǔn)確性的先決條件。培養(yǎng)基對藥敏結(jié)果的影響因素具體如下:

1、pH:pH的變化可導(dǎo)致抑菌圈直徑變大或變小。

2、能拮抗菌藥活性的物質(zhì):如鈣、鎂離子能降低氨基糖苷類藥物的抗菌活性。

3、厚度:標(biāo)準(zhǔn)厚度為4mm,厚度 4mm,抑菌圈則會變小, 4mm,則會變小。

4、濕度:使用藥物平皿前一般先在室溫平衡半個小時,使培養(yǎng)基表面干燥,濕度過高不利于細菌的生長或?qū)咕幤鸬较♂屪饔谩?p>5、硬度:硬度過高不利于抗菌藥在瓊脂中的擴散,可導(dǎo)致抑菌圈直徑變小。

6、營養(yǎng)條件:營養(yǎng)條件太差不利于細菌的生長,抑菌圈直徑變大;反之,培養(yǎng)及營養(yǎng)條件太好會讓抑菌圈直徑變小。

將這些原理和原則解說后,針對他們對話中的問題,我一一進行了剖析:

根據(jù)CLSI,絕大多數(shù)細菌藥敏試驗瓊脂均為標(biāo)準(zhǔn)的M-H瓊脂,M-H瓊脂基本不含有抑制磺胺類藥物和四環(huán)素類藥物抗菌活性的物質(zhì),可滿足大多數(shù)細菌的生長需要,腸球菌對營養(yǎng)要求不高且生長速度較快,因此可選用M-H瓊脂(MHA),而不是血平皿。對于大多數(shù)細菌,MHA是不需要添加羊血,血液或血清中的蛋白會不同程度結(jié)合抗菌藥分子,影響了抗菌藥物的活性,如羊血中的某些成分可抑制磺胺類藥物和四環(huán)素類藥物抗菌活性,同時也可影響新生霉素、萘夫西林及頭孢菌對腸球菌的藥敏結(jié)果。

溶血鏈球菌、肺炎鏈球菌等營養(yǎng)要求高的苛養(yǎng)菌則需要使用M-H瓊脂+5%脫纖維羊血培養(yǎng)基,也叫M-H藥敏試驗血瓊脂平板(MHBA)。MHBA與普通的分離細菌的血平板或者哥倫比亞血平板(CNA)雖然長相相似,但配方及產(chǎn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(如pH、濕度等)均不一樣,是不能相互代替使用的。為了比較肺炎鏈球菌ATCC49619在MHBA和 CNA培養(yǎng)基上的藥敏結(jié)果,在其他條件均一致的情況下我們分別用MHBA和CNA做了藥敏試驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn),CNA的藥敏結(jié)果抑菌圈直徑偏大,細菌生長情況較差,從而導(dǎo)致 假敏感 結(jié)果。

因此,作為一名合格的微生物檢驗人員,我們應(yīng)該時刻遵守操作規(guī)程,牢記標(biāo)準(zhǔn)要求,熟讀規(guī)則原理,杜絕含糊不清、似是而非,才能確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。

 
 
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