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孔隙電泳規(guī)范操作規(guī)程

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2021-03-20  來源:儀器網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):50
核心提示:技術(shù)指導(dǎo)薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗技術(shù),常用于進(jìn)行藥品的鑒別,雜質(zhì)檢查或含量測定。在使用時,會將適宜的固定相涂布于玻璃板上,成一均勻薄層,等點(diǎn)樣、展開后,與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比。 
技術(shù)指導(dǎo)薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗技術(shù),常用于進(jìn)行藥品的鑒別,雜質(zhì)檢查或含量測定。在使用時,會將適宜的固定相涂布于玻璃板上,成一均勻薄層,等點(diǎn)樣、展開后,與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比。
   操作方法:
   1. 薄層板制備:將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的泡后,倒入涂布器中,在玻璃板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布(厚度為0.2—0.3mm),取下涂好薄層的玻璃板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘。即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度。
   2. 點(diǎn)樣:用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上,一般為圓點(diǎn),點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm,點(diǎn)樣直徑為2——4mm,點(diǎn)間距離約為1.5—2.0cm。點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜,點(diǎn)樣時必須注意勿損傷薄層表面。
   3. 展開:展開室如需預(yù)先用展開劑飽和,可在室中加入足夠量的展開劑,并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條,一端浸入展開劑中,密封室頂?shù)纳w,使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5—1.0cm,密封室蓋。
   4. 檢測:等展開至規(guī)定距離,取出薄層板,晾干,按各品種項下的規(guī)定檢測,如需用薄層掃描儀對色譜斑點(diǎn)作掃描檢出,或直接在薄層上對色譜斑點(diǎn)作掃描定量,則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法,除另有規(guī)定外,可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及使用說明,結(jié)合具體情況,選擇吸收法或熒光法,用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多,故應(yīng)在保證供試品的斑點(diǎn)在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下,將供試品與對照品在同一塊薄層上展開后掃描,進(jìn)行比較并計算定量,以減少誤差。
   注意事項:
   1. 所用玻璃板應(yīng)洗凈不掛水珠,光滑平整。
   2. 鋪板要均勻,厚度適宜,并于室溫下晾干后在110℃活化30分鐘,置于有干燥劑的干燥箱或干燥器中備用。
   3. 點(diǎn)樣點(diǎn)一般為圓點(diǎn),不能太大。
 
關(guān)鍵詞: 薄層 nbsp 展開 掃描 點(diǎn)樣
 
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