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GRM1酶;代謝物型型色氨酸特異性1(GRM1)改組酶

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2021-01-27  來源:儀器網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):57
核心提示:GRM1蛋白;代謝型型谷氨酸受體1(GRM1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Glutamate Receptor, Metabotropic 1 (GRM1)GPRC1A; GRM1A; MGLUR1; MGLUR1A; mGl

GRM1蛋白;代謝型型谷氨酸受體1(GRM1)重組蛋白

英文名稱:Recombinant Glutamate Receptor, Metabotropic 1 (GRM1)

GPRC1A; GRM1A; MGLUR1; MGLUR1A; mGluR1

來源:原核表達(dá)

宿主:E.coli

規(guī)格:10μg  50μg  200μg  1mg  5mg

內(nèi)毒素水平: 1.0EU/μg(LAL法測定)具體詳見說明書

片段與標(biāo)簽:Ser165~Glu592 with N-terminal His Tag

物種來源(人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、獼猴、山羊、綿羊、馬、牛、豬、雞、狗等其他物種多物種)相同的名稱,不同的物種。

GRM1蛋白;代謝型型谷氨酸受體1(GRM1)重組蛋白性狀:凍干粉

表達(dá)系統(tǒng):  大腸桿菌

產(chǎn)品純度: 95%-98%(SDS-PAGE RP-HPLC)

保存條件:如果樣品在2-4周內(nèi)使用,可以在4°C低溫儲存。 

長期儲存,建議添加載體蛋白(0.1%HSA或BSA),并儲存在-20~ -80°C。避免多次凍融。

A、GRM1蛋白;代謝型型谷氨酸受體1(GRM1)重組蛋白原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)以大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)為代表,具有遺傳背景清楚、成本低、表達(dá)量高和表達(dá)產(chǎn)物分離純化相對簡單等優(yōu)點,缺點主要是蛋白質(zhì)翻譯后缺乏加工機制,如二硫鍵的形成、蛋白糖基化和正確折疊,得到具有生物活性的蛋白的幾率較小,查看原核蛋白表達(dá)實驗案例。

 

B、酵母蛋白表達(dá)系統(tǒng)以甲醇酵母為代表,具有表達(dá)量高,可誘導(dǎo),糖基化機制接近高等真核生物,分泌蛋白易純化,易實現(xiàn)高密發(fā)酵等優(yōu)點。缺點為部分蛋白產(chǎn)物易降解,表達(dá)量不可控,查看酵母蛋白表達(dá)實驗案例。

 

C、桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)憑借高特異性高表達(dá)水平及翻譯后修飾功能,被用作一種表達(dá)大規(guī)模蛋白的強有力的工具系統(tǒng),相對來說,操作流程較多,成本偏高。查看桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)案例

 

D、哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá)服務(wù)和昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)主要優(yōu)點是蛋白翻譯后加工機制最接近體內(nèi)的天然形式,最容易保留生物活性,缺點是表達(dá)量通常較低,穩(wěn)定細(xì)胞系建立技術(shù)難度大,生產(chǎn)成本高。查看哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)案例。

表達(dá)出來的蛋白比實際大小要小,這是為什么?

GRM1蛋白;代謝型型谷氨酸受體1(GRM1)重組蛋白主要原因有如下幾個方面

1. 蛋白本身被降解了,可以存在一些不利于該蛋白穩(wěn)定的蛋白酶。

2. 翻譯起始位點的問題:如果一個類似于核糖體結(jié)合位點(AAGGAGG)的序列加上適當(dāng)?shù)拈g隔序列出現(xiàn)在了ATG密碼子上游,降解就會有可能出現(xiàn)。解決的方法可以采用兩端都帶有融合標(biāo)簽的載體,例如pET系列部分載體在N-端和C-端都有His-Tag融合標(biāo)簽。這樣,全長蛋白就可以通過提高咪唑濃度,在洗脫時將截短蛋白與全長蛋白區(qū)分開。或者在蛋白兩端采用不同標(biāo)簽,進而通過親和純化的方式得到全長蛋白。

3. 影響蛋白穩(wěn)定性的另外一個因素是與N端Met相鄰的氨基酸,即N端原則,當(dāng)下列氨基酸出現(xiàn)在N端時: Arg、 Lys、Phe、Leu、Trp和Tyr 蛋白的半衰期較短,蛋白會存在不穩(wěn)定降解的問題,特別是Leu,當(dāng)它出現(xiàn)在第二個位置上時,蛋白極度不穩(wěn)定。在選擇克隆位點時, Nco I 和Nde I都是 是一個比較好的N端的克隆位點選擇,而使用NdeI的時候就要特別留意Leu的出現(xiàn)。

 

 


 
關(guān)鍵詞: 蛋白 表達(dá) nbsp GRM1 系統(tǒng)
 
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