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IgA1酶;淋巴細胞A1(IgA1)改組酶

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2021-01-27  來源:儀器網  作者:Mr liao  瀏覽次數:52
核心提示:IGA1蛋白;免疫球蛋白A1(IGA1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Immunoglobulin A1 (IgA1)IGHA1; Immunoglobulin heavy constant alpha 1; Ig alpha-

IGA1蛋白;免疫球蛋白A1(IGA1)重組蛋白

英文名稱:Recombinant Immunoglobulin A1 (IgA1)

IGHA1; Immunoglobulin heavy constant alpha 1; Ig alpha-1 chain C region

來源:原核表達

宿主:E.coli

規(guī)格:10μg  50μg  200μg  1mg  5mg

內毒素水平: 1.0EU/μg(LAL法測定)具體詳見說明書

片段與標簽:DYKDDDDK+Ala1~Tyr353 with N-terminal His Tag

物種來源(人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、獼猴、山羊、綿羊、馬、牛、豬、雞、狗等其他物種多物種)相同的名稱,不同的物種。

性狀:凍干粉

表達系統(tǒng):  大腸桿菌

產品純度: 90%-98%(SDS-PAGE RP-HPLC)

保存條件:如果樣品在2-4周內使用,可以在4°C低溫儲存。 

IGA1蛋白;免疫球蛋白A1(IGA1)重組蛋白長期儲存,建議添加載體蛋白(0.1%HSA或BSA),并儲存在-20~ -80°C。避免多次凍融。

影響蛋白原核表達的因素很多,如蛋白的親水性、密碼子的稀有性、蛋白毒性等。如疏水性過強,就難以表達;稀有密碼子過多或多個稀有密碼子連在一起也難以表達。我以前也遇到過這種情況,首先要分析你的蛋白序列和二級結構,看看是否存在這些影響因素。如果必須要表達全長蛋白,像你這種情況難度就比較大,可以進行密碼子的改造,或者更換載體,或者更換宿主菌??茨阍囼灥哪康模绻恍枰磉_全長蛋白,如表達部分抗原性強的片段,可以簡單一點,表達部分片段即可。

IGA1蛋白;免疫球蛋白A1(IGA1)重組蛋白原核表達秘笈:表達前的分析比什么都重要:

表達不同于其它一些實驗,比如:提取質粒、PCR、電鏡切片,這些人為控制的因素比較多,出問題相對來說也比較好分析。表達呢,你把質粒克隆好啦,交給細胞,然后有些事情就不全是你要怎樣就怎樣了。原核表達在表達當中來說還是比較簡單,細菌培養(yǎng)條件簡單、生長速度快,需要的儀器和培養(yǎng)基都比較便宜。當然,它也存在一些缺乏高級修飾、細胞內部還原性過高等缺點。

原核表達從一開始的設計就非常重要,所謂好的開始是成功的一半。做足準備功夫,可是省去很多將來后悔的事情。首先,我們要根據是否要求可溶將載體分成兩大類,如果希望可以同時嘗試多種表達系統(tǒng),也有許多商業(yè)化的系統(tǒng)供選擇。

前面已經介紹過許多公司的商業(yè)化載體、菌株和多系統(tǒng)表達體系,現在我想先從自己的蛋白分析講起。同樣的載體、同樣的系統(tǒng),很可能表達這個蛋白表達量奇高,但是另外一個就是做不出來,所以沒有全能的載體,只有永恒的分析。當然如果你的蛋白曾經在原核系統(tǒng)中成功表達出來那是好的,IGA1蛋白;免疫球蛋白A1(IGA1)重組蛋白選擇同樣的載體表達成功率會高很多。如果沒有也好嘗試找一些曾經表達過和你的蛋白擁有相類似結構的文獻。比如大部分含有哺乳動物src同源的SH2蛋白相互作用域的蛋白都是用pGEX系列載體表達出來的。根據經驗而言,含有較少半胱氨酸和脯氨酸的、平均大小為60kD的單體蛋白較容易表達。


 
關鍵詞: 蛋白 表達 IGA1 載體 原核
 
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