pFastBac Dual 載體基本信息質(zhì)粒類型:昆蟲細胞表達載體啟動子:Polyhedrin, P10表達水平:高克隆方法:多克隆位點，限制性內(nèi)切酶載體大小:5238 bp (查看載體序列)5 測序引物:pFastbac-F: TATTCCGGATTATTCATACC3 測序引物:pFastBac-R: ACAAATGTGGTATGGCTGA載體抗性:Ampicillin (氨芐青霉素)篩選標(biāo)記:Gentamicin (慶大霉素)備注:在昆蟲細胞中，能夠同時表達兩個基因。訂購信息產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱規(guī)格價格LM1172pFastBac Dual5ug1200質(zhì)粒圖譜

pFastBac Dual 載體原理機制

載體效應(yīng)實驗 用牛血清白蛋白耦聯(lián)二硝基苯 (BSA-DNP) 和卵白蛋白耦聯(lián)二硝基苯 (OA-DNP) 制備載體—半抗原，觀察載體在抗體產(chǎn)生中的作用。首先以 BSA － DNP 對小鼠進行初次免疫，然后分別用 BSA － DNP 和 OA － DNP 進行再次免疫，觀察載體對抗 DNP 抗體產(chǎn)生的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，只有當(dāng)初次和再次免疫時，半抗原耦聯(lián)在相同的載體上才能產(chǎn)生抗半抗原抗體的再次應(yīng)答。此作用被稱為載體效應(yīng)。載體效應(yīng)實驗證明了載體不是單純起運載半抗原的作用，而是具有載體特異性。因此揭示了一個完全抗原分子，必須具有pFastBac Dual 載體決定基和半抗原決定基。并進一步證明了在抗體形成過程中存在有對載體特異性反應(yīng)細胞，即 T 淋巴細胞為載體的反應(yīng)細胞，對抗體產(chǎn)生起輔助作用；也存在對半抗原特異性反應(yīng)細胞，即 B 淋巴細胞。

實驗組 初次免疫 再次免疫 抗DNP抗體

1 BSA-DNP BSA-DNP +++

2 BSA-DNP OA-DNP +

3 BSA-DNP+OA OA-DNP +++

抗體的特異性來自于B細胞膜表面Ig受體對抗原的特異性識別，以致B細胞只能和其特異性識別的抗原結(jié)合并進行加工處理。但是作為T細胞依賴性抗原（Td-Ag），被B細胞或巨噬細胞加工后，只剩下一些MHC-Ⅱ類分子結(jié)合的抗原寡肽段被呈遞給Th細胞，以產(chǎn)生反饋性的活化該特異性B細胞克隆的信號，并使B細胞分化成抗體分泌細胞。 [1]

在一個完整的大抗原分子上與Ab結(jié)合的表位和與MHC-TCR結(jié)合的序列可能不同，與抗體結(jié)合的表位相當(dāng)于半抗原部分與MHC-TCR結(jié)合序列相當(dāng)于半抗原載體部分。從而顯示出在Td-Ag中半抗原與載體效應(yīng)發(fā)生的分子基礎(chǔ)。

同樣的半抗原與不同的載體偶聯(lián)結(jié)合都可以產(chǎn)生相應(yīng)Ab，但其輔助T細胞可以不用。特異性的抗體產(chǎn)生后，可引起一系列的免疫效應(yīng)。

在免疫應(yīng)答中，B細胞識別半抗原，并提呈載體表位給CD4陽性T細胞；Th細胞識別載體表位。故通過載體把特異的T-B細胞之間連接起來，T細胞才能激活B細胞，使B細胞分泌抗體。這就是載體效應(yīng)。