GAPDH蛋白；甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白

英文名稱：Recombinant Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH)

G3PD; GAPD; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase GAPDH

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主：E.coli

規(guī)格：10μg  50μg  200μg  1mg  5mg

內(nèi)毒素水平： 1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)具體詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)

片段與標(biāo)簽：Gly2~Ser148 (Accession # P04406) with N-terminal His Tag

物種來(lái)源（人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、獼猴、山羊、綿羊、馬、牛、豬、雞、狗等其他物種多物種）相同的名稱，不同的物種。

GAPDH蛋白；甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白性狀：凍干粉

表達(dá)系統(tǒng)：  大腸桿菌

產(chǎn)品純度： 95%-98%（SDS-PAGE RP-HPLC）

保存條件：如果樣品在2-4周內(nèi)使用，可以在4°C低溫儲(chǔ)存。 

長(zhǎng)期儲(chǔ)存，建議添加載體蛋白（0.1％HSA或BSA），并儲(chǔ)存在-20~ -80°C。避免多次凍融。

GAPDH蛋白；甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白的分泌表達(dá)優(yōu)點(diǎn):

1、一些可被細(xì)胞內(nèi)蛋白酶所降解的蛋白質(zhì)分泌到周質(zhì)或培養(yǎng)基中可增加其穩(wěn)定性；

2、有些在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)無(wú)活性的蛋白分泌表達(dá)時(shí)能夠按適當(dāng)?shù)姆绞竭M(jìn)行準(zhǔn)確折疊，增加到蛋白的活性；

3、 由于蛋白質(zhì)信號(hào)肽和編碼序列間被切割，所以分泌蛋白產(chǎn)物不含氨基酸起始密碼子 ATG 所編碼的甲硫氨酸，而甲硫氨酸會(huì)影響許多蛋白的活性。

GAPDH蛋白；甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白和天然蛋白有什么區(qū)別:

蛋白質(zhì)重組，先要全部水解為氨基酸，蛋白質(zhì)的種類多就是因?yàn)樗臄?shù)量大，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，空間結(jié)構(gòu)千變?nèi)f化。而基本的氨基酸只有20中，所以它重組以后就可能變成完全不同的東西，控制和以前完全無(wú)關(guān)的代謝過(guò)程。

基因重組只是控制同一性狀表達(dá)不同而已，但是它不會(huì)改變性狀的基本情況。如：控制眼睛顏色的基因，親本的基因重組之后可能親本為黑色，子代便為藍(lán)色。但不會(huì)控制眼睛顏色的基因在重組之后就變成控制耳朵的基因。

GAPDH蛋白；甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式，原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài)，真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存，這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定，在 -80℃ 條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解，其中溶解的方法非常關(guān)鍵，因?yàn)槿芙獠缓脮?huì)降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過(guò)程中也需要仔細(xì)注意，這些都是用戶在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問(wèn)題。

（1）原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。Immune tech 大腸桿菌表達(dá)的凍干重組蛋白，已經(jīng)從包涵體中提純，添加了蛋白保護(hù)劑，使用過(guò)濾后的無(wú)菌水作為復(fù)溶劑即可，復(fù)溶凍干蛋白 100μg，用 86μl 的超純水，輕輕搖晃使蛋白溶解，再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可完全溶解，一定不能使用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩或劇烈搖晃。

 （2）真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯，還要進(jìn)行翻譯后的加工，使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常，所以重組蛋白必須在真核細(xì)胞中進(jìn)行，如哺乳動(dòng)物細(xì)胞能夠識(shí)別和去除基因中的內(nèi)含子，對(duì)翻譯后的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工，這樣表達(dá)的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來(lái)保存，保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

（3）重組蛋白的保護(hù)劑。在凍干和儲(chǔ)存過(guò)程中常用的保護(hù)劑或穩(wěn)定劑有糖類，多元醇，聚合物，表面活性劑，某些蛋白和氨基酸等。我們通常加 8%（質(zhì)量比體積）的海藻糖和甘露醇作為凍干保護(hù)劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)改變以及凍干過(guò)程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集，甘露醇也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護(hù)劑和填充劑。