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湘儀反應(yīng)器:菌株細(xì)胞核基因的提煉檢查科學(xué)儀器

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2021-01-27  來源:儀器網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):73
核心提示:以下介紹一種最常用的方法: 堿裂解法:此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴增、銀染序列分析。方法如下: 1、接1%含質(zhì)粒的大腸桿菌細(xì)胞于2ml LB培養(yǎng)基。 2、37℃振蕩培養(yǎng)過夜。 3、取1.
以下介紹一種最常用的方法: 堿裂解法:此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴增、銀染序列分析。方法如下: 1、接1%含質(zhì)粒的大腸桿菌細(xì)胞于2ml LB培養(yǎng)基。 2、37℃振蕩培養(yǎng)過夜。 3、取1.5ml菌體于Ep管,以4000rpm離心3min,棄上清液。 4、加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/L EDTA pH8.0,25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合。 5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH,1% SDS),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5 min 。 6、加入0.15m1預(yù)冷溶液III(5 mol/L KAc,pH4.8),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5 min 。 7、以10,000rpm離心20min,取上清液于另一新Ep管
 
關(guān)鍵詞: 方法 質(zhì)粒 溶液 DNA
 
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