A2780/DDP細胞用GIBCO公司RPMI1640或高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),補加10-12%進口優(yōu)質(zhì)胎牛血清和常規(guī)的雙抗即可。
細胞買回去以后現(xiàn)擴增凍存一批保種,然后加DDP 2 mmol/L 處理10天就可以開始實驗了。
細胞消化: 0.25%Trypsin + 0.02%EDTA; 細胞凍存:用10%DMSO + 90%進口血清
HCT-8/V( VCR終濃度1 g/ml)操作說明:
HCT-8/V細胞,中文名稱:HCT-8耐長春新堿結(jié)腸癌細胞。是一款素爾細胞庫熱賣產(chǎn)品之一,VCR終濃度1 g/ml。HCT-8/V細胞,素爾生物用GIBCO公司RPMI1640或高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),補加10-12%德國SERANA原裝進口優(yōu)質(zhì)胎牛血清和常規(guī)的雙抗即可。收到HCT-8/VCR細胞后先擴增凍存一批保種,然后在實驗前用VCR終濃度1 g/ml的培養(yǎng)基處理細胞10天,把非耐藥的細胞除掉,然后再開始實驗。
細胞消化: 0.25%Trypsin + 0.02%EDTA; 細胞凍存:用10%DMSO + 90%血清。
HEK-293-6e細胞使用F17+L谷氨酰胺培養(yǎng)液,37℃ 下置于5%CO2培養(yǎng)箱中。待細胞融合至80%,用0.25%胰酶消化傳代后接種(細胞密度5 XlO4)于培養(yǎng)瓶或孔板,待細胞融合至約70%后用于實驗。需要設備是:搖床(提前準備)
MCF-10A細胞株為素爾細胞庫的佼佼者,熱賣推薦細胞株之一,代數(shù)靠前,狀態(tài)穩(wěn)定,細胞飽滿,有光澤。素爾細胞庫擁有400多株細胞株細胞系,20多株耐藥株,并且提供Identi trade; STR Cas9穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株系列、 Identi trade; STR示蹤細胞株系列、Identi trade; STR細胞株系列、示蹤細胞、穩(wěn)定細胞株構(gòu)建、 細胞代感染、篩藥細胞株產(chǎn)品、篩藥細胞株定制。
產(chǎn)品名稱: MCF-10A細胞
中文名稱: 人正常乳腺上皮細胞
生長狀態(tài):貼壁生長 懸浮生長 半貼壁半懸浮
細胞形態(tài):成纖維樣 多角形 上皮樣 圓形 梭形 球形 不規(guī)則形
細胞背景:MCF-10A細胞是一個非致瘤的上皮細胞株。 這株細胞通過在低鈣離子濃度的無血清培養(yǎng)液中長時間培養(yǎng)而得到。MCF 10A是從群體中的貼壁細胞繁衍得到的。也有從懸浮群體繁衍得到的細胞(見MCF 10F, ATCC CRL-10318)。 細胞呈唾液酸粘蛋白陽性, 細胞角蛋白陽性, 牛奶脂肪球抗原陽性。在膠原中表現(xiàn)出三維生長, 并在長滿后形成圓頂狀。 因而, 細胞沒有終端分化或蓑老的表型。這株細胞對胰島素、糖皮質(zhì)激素、霍亂毒素和表皮生長因子(EGF)有響應。 在電子顯微鏡下特征象燈管細胞而不象肌上皮細胞。 通過MFA-Breast和MC-5單克隆抗體檢測陽性表明它表達乳房特異性抗原。 培養(yǎng)液中的鈣離子濃度對細胞形態(tài)有重要影響。
培養(yǎng)條件:DMEM.MEM.1640.IMDM.F12.DMEM/F12+10% FBS
培養(yǎng)條件:1:2傳代
質(zhì)控標準:無支原體、無細菌、無真菌、符合標準
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
細胞數(shù)量:500000cells/瓶
儲存方法:液氮(凍存)或復蘇培養(yǎng)。
運輸方式:凍存的細胞干冰運輸,復蘇的細胞冰袋運輸。
特惠價格:致電 ( )
MCF-10A細胞株到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?p>微生物及支原體檢測:陰性
安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加完全培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項:
1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。
5、在操作計數(shù)前要將未待測懸液吹打均勻;滴入細胞懸液時蓋玻片下不要出現(xiàn)氣泡;若滴入懸液時的量太多,會使細胞懸液流入旁邊的槽中。
上海素爾生物提供400多種類細胞株細胞系,20多株穩(wěn)定耐藥株,國產(chǎn)細胞,進口細胞,復蘇細胞,凍存細胞,原代細胞,植物細胞,干細胞,腎臟細胞,生殖細胞,小鼠正常細胞,大鼠正常細胞等。
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Hep G2 人肝癌細胞 human hepatocellular carcinoma cell line
Hep 3B 人肝癌細胞 human hepatocellular carcinoma cell line
HL-7702 人肝細胞 human hepatocyte
BEL-7402 人肝癌細胞 human hepatocellular carcinoma cell line
HuH-7 人肝癌細胞 human hepatocellular carcinoma cell line
MHCC97-L 人低轉(zhuǎn)移性肝癌細胞 human hepatocellular carcinoma cell line low metastatic potential subline
MHCC97-H 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細胞 human hepatocellular carcinoma cell line high metastatic potential subline
原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培 養(yǎng);因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì),如果是正常細胞,仍然保留二倍體數(shù)。不同的原代細胞傳代次數(shù)不同,具體需咨詢客服人員或者自行查閱 相關(guān)資料。
細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標志的培 養(yǎng)細胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,理論上可培養(yǎng)到40-50代。
客戶應具有一定細胞培養(yǎng)知識與經(jīng)驗,并具備基本培養(yǎng)條件(細胞培養(yǎng)實驗室,無菌操作臺、CO2培養(yǎng)箱,可拍照倒置顯微鏡等),并按說明書要求準備好相應的無菌的培養(yǎng)基、血清、雙抗、細胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板等。如果因客戶缺少基本培養(yǎng)經(jīng)驗和培養(yǎng)條件而導致細胞死亡或污染,不在我司售后責任之內(nèi)。
潔凈區(qū),并不是沒有細菌,而是細菌的數(shù)量非常少,國家標準100級的潔凈標準是浮游菌數(shù)不得超過5個每立方米,沉降菌數(shù)不得超過1個每培養(yǎng)皿.而國外的標準比我國的還要高一點,要求的數(shù)量更少。在我們的潔凈操作臺里,并不是真正一個細菌都沒有的,所以在操作的時候還是要盡量利索迅速地完成操作。盡量減少進入培養(yǎng)體系細菌的數(shù)量。 處理細菌污染的重要原則就是:無限地稀釋細菌的濃度,無限地減少細菌的數(shù)量! 1).將污染的培養(yǎng)液倒掉,轉(zhuǎn)燒瓶口,加入10mlPBS,適當晃動清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。轉(zhuǎn)燒瓶口。 2).繼續(xù)加入10mlPBS,同樣方法晃動,清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。 3).繼續(xù)加入5mlPBS,同樣方法洗瓶,主要是培養(yǎng)面,然后倒掉。 4).重復步驟3再洗。 5).重復步驟3再洗。 6).加入3-5ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。 7).加入3ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。 8).再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。 9).加入10ml培養(yǎng)液,加入2ml雙抗,放置培養(yǎng)箱培養(yǎng),5小時之后,倒掉培養(yǎng)基,加入PBS洗瓶兩次,然后加入胰酶消化,吹打后置于離心機800-1000r/min離心,然后洗一次。置于新的培養(yǎng)瓶里培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。 10).24h之后,視情況換液,若仍然污染嚴重,培養(yǎng)基渾濁,重復以上步驟,若看不到污染物,則繼續(xù)步驟1)、3)、4)、6)、8),然后加入培養(yǎng)液培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗. 11).24h之后,若仍污染嚴重,可再重復一次,若還污染只能棄之(不過一般沒有出現(xiàn)這種情況),若鏡下不見污染物,則換液PBS洗瓶,正常培養(yǎng)。 以上是對于細菌污染(常見為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌);若為霉菌或者真菌污染,加入兩性霉素B清洗和培養(yǎng),終濃度一般為2.5 g/ml(在30 g/ml時會有細胞毒性)。另外也可以選擇在培養(yǎng)基里加3ug/ml的制霉菌素或放線菌素D。其它操作同;若為支原體或者黑膠蟲污染,基本上都是重新弄細胞了。對于黑膠蟲污染,我們會預防為主?;旧系聡鳶ERANA胎牛血清、GIBCO胎牛血清中不含黑膠蟲,我們建議購買!以上方法主要是針對貼壁生長的細胞,在操作的過程中,一定要小心操作動作,輕柔緩慢,切忌大動作魯莽。防止細胞脫落。
咨詢 發(fā)貨周期,來源,說明書,訂購流程,售后說明書,請致電客服,人結(jié)腸癌細胞,人卵巢癌細胞,人肺癌細胞,人肝癌細胞,人腎臟細胞,人胃癌細胞等熱賣產(chǎn)品盡在素爾生物
賴氨酸脫羧酶 3ml
精氨酸脫羧酶 3ml
氨基酸對照管 3ml
VP-MR肉湯 3ml VP-MR測定
Cary-Blain運送培養(yǎng)基 3ml 用于致病菌標本的采集、運輸和保存
半固體瓊脂 3ml 用于一般菌株保存與動力觀察
甘露醇瓊脂 斜面 甘露醇試驗
SS增菌液 10ml 沙門氏、志賀氏菌增菌培養(yǎng)
堿性蛋白胨水 10ml 霍亂弧菌增菌培養(yǎng)
七葉靈瓊脂 高層 測定細菌分解七葉靈的能力
三糖鐵瓊脂 斜面 腸桿菌科細菌生化鑒定
克氏雙糖鐵瓊脂 斜面 腸桿菌科細菌生化鑒定
蛋白胨水 3ml 產(chǎn)吲哚試驗
沙保羅瓊脂 斜面 供真菌及酵母樣菌分離培養(yǎng)
Kohn明膠管 肉湯明膠 測定細菌液化明膠、快速、敏感
硝酸鹽產(chǎn)氣管 半固體 硝酸鹽試驗
亞硝酸鹽產(chǎn)氣管 半固體 亞硝酸鹽試驗
鳥氨酸脫羧酶 3ml 測定細菌分解氨基酸的能力
葡萄糖酸鹽培養(yǎng)基 3ml 葡萄糖酸鹽試驗
西蒙氏枸櫞酸鹽 斜面 枸櫞酸鹽利用實驗
MIU培養(yǎng)基 高層 動力-靛基質(zhì)-尿素實驗
SIM培養(yǎng)管 高層 硫化氫-動力-靛基質(zhì)實驗
硫化氫培養(yǎng)管 高層 硫化氫試驗用
乙酰胺培養(yǎng)管 斜面 乙酰胺利用試驗
氧化/發(fā)酵管 半固體 細菌氧化發(fā)酵實驗
玉米吐溫80瓊脂 斜面 觀察厚膜孢子及假菌絲
TTC沙保羅瓊脂 斜面 同沙保羅瓊脂
馬鈴薯葡萄糖瓊脂 斜面 同玉米吐溫瓊脂
羅琴改良培養(yǎng)基 斜面 供結(jié)核菌的分離培養(yǎng)用
伊紅美藍瓊脂/SS瓊脂 9cm 主要分離腸道菌
TCBS瓊脂/4號瓊脂 9cm 分離霍亂弧菌
血瓊脂/麥康凱瓊脂 9cm 分離尿、膽汁、膿汁等標本致病菌
麥康凱瓊脂/TCBS瓊脂 9cm 用于分離糞便等標本的腸道致病菌和致病弧菌
血瓊脂/巧克力瓊脂 9cm 用于分離痰、腦脊液、分泌物等標本的致病菌
血瓊脂/中國藍瓊脂 9cm 分離尿、膽汁、膿汁等標本致病菌
血瓊脂/伊紅美藍瓊脂 9cm 分離尿、膽汁、膿汁等標本致病菌
血瓊脂/巧克力+萬古霉素瓊脂 9cm 分離霍亂弧菌用
血液增菌培養(yǎng)基 10 30ml 采用進口原料
血液增菌培養(yǎng)基 10 30ml 采用國產(chǎn)原料
L型細菌增菌液 10 30ml L型細菌的增菌培養(yǎng)
雙相血培養(yǎng)瓶 瓊脂+40ml肉湯 用于血液及其他體液的增菌
厭氧血培養(yǎng)瓶 10 30ml 含多種生長因子、營養(yǎng)豐富
非發(fā)酵菌科(Rap.N-15) 10T IND、NO3I、NO3II、液體石蠟
葡萄球菌(Rap.S-16) 20T NO3I、NO3II、VPI、VPII、液體石蠟
酵母菌同化(KT-16C) 10 顯色判讀
鏈球菌鑒定試劑(STREP) 10T VPI 、VPII
衣原體檢測試劑盒 20T 常溫提LPS測定
嗜酸性粒細胞染色液 3 10ml 有效期1年
過氧化物酶染色液 60ml 1 2-8℃保存,有效期6個月
鐵染色液 4 25ml 有效期6個月
精子體外染液 2 25ml用于精子的體外染色、記數(shù)。有效期1年
精子稀釋液 4 25ml 精液稀釋用。有效期1年
婦科白帶涂片快速染液 4 25ml 用于婦科白帶涂片等的多項快速檢查。有效期1年
H-E快速單一染色液 2 250ml 操作簡便,一步完成,適用于婦科體驗。有效期1年
蘇木素-伊紅染色液 2 500ml病理組織切片良好的染色液之一。有效期1年
巴氏染色液 組 經(jīng)典的病理染色液
快速巴氏染色液I 200ml 快速二步法:適用于陰道、子宮頸等分泌物染色
快速巴氏染色液II 二步法:適用于痰液、胃液等分泌物染色
膽汁七葉苷 高層 用于腸球菌的分離腸桿菌科(Rap.E-15) 20T IND、MR、液體石蠟
革蘭氏陰性桿菌(KONT 20E) 20T IND、NO3I、NO3II、VPI、VPII、TDA、液體石蠟
如果需要凍存形式,這類產(chǎn)品對溫度極為敏感,需要液氮保存。在運輸過程中,只能以干冰形式運輸,訂購此類產(chǎn)品容易出現(xiàn)意外,所以必須要格外謹慎,說明書一般會指示細胞株會加干冰運輸。并且要求客戶收到后液氮儲存,本公司強烈建議,您收到冷凍運輸?shù)募毎暌活惍a(chǎn)品后要立即復蘇。不能正常復蘇的,售后期限內(nèi)投訴,我們會盡力解決。