經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。
MEM是由Eagle s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度。
Corning 10-010-CVR MEM培養(yǎng)基
DMEM
BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的,現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
Corning 10-013-CVR DMEM高糖培養(yǎng)基,含丙酮酸鈉
aMEM
aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞。
Corning 10-022-CVR Alpha MEM(aMEM)培養(yǎng)基
Ham s F12
Ham s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)。
RPMI 1640
RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
Corning 10-040-CVR RPMI 1640培養(yǎng)基
干粉培養(yǎng)基
以前大部分實驗室都是用干粉培養(yǎng)基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調(diào)pH值,過濾,過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質(zhì)并不理想,所以培養(yǎng)的效果會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基,這種人為的誤差會減少,因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的,批間差會很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多,以前是這樣,但現(xiàn)在非也。
Corning R50-020-PB RPMI 1640培養(yǎng)基 干粉
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無血清培養(yǎng)基
無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顧名思義,就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清,但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等,能減少上述血清帶來的不利因素,使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是的,從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外,它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。
如何選擇培養(yǎng)基
經(jīng)常聽到有人問,這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個問題的答案可以很簡單,也可以好復雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫,那很簡單,問供應(yīng)商就行了?;蛘哒业较嚓P(guān)的文獻,作為參考。
培養(yǎng)基這么多種,要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的,或者是專門針對某一種細胞的,如昆蟲基本培養(yǎng)基(Corning 13-200-CVR)和神經(jīng)祖細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(Corning 40-400-CVR), 但是大部分液體培養(yǎng)基都是配方的,也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應(yīng)商推薦,然后用自己的細胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出zui合適的培養(yǎng)基。畢竟實踐出真知。
怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品?
首先,當然需要找對品牌,其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商,針對自己所養(yǎng)的細胞,咨詢供應(yīng)商該選用哪種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。
ACHN人腎細胞腺癌細胞
PLC/PRF/5人肝癌細胞
RKO人結(jié)腸腺癌細胞
SW480人結(jié)腸腺癌細胞
SW598人結(jié)腸癌細胞
A-673 人橫紋肌瘤細胞
NTERA-2人畸胎瘤細胞
C-33 A人子宮頸癌
Calu-3人肺腺癌 (胸水)
ES-2人卵巢透明細胞癌(zui低耐藥)
BIU-87人膀胱癌細胞
H295R人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞
H157人非小細胞肺腺癌細胞
H1264人肺癌細胞
H1339人小細胞肺癌
LS180人結(jié)腸腺癌細胞
HK-2人腎小管上皮細胞
Colo201人結(jié)直腸腺癌細胞(半貼壁)
NS-3人胃癌細胞
HCC38人乳腺導管癌細胞
NG108-15小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞與大鼠膠質(zhì)瘤細胞之融合細胞
BT-20人乳腺癌細胞
H209(懸浮)人小細胞肺癌細胞
DMS153(懸?。┤诵〖毎伟┘毎?p>MNNG/HOS人骨肉瘤細胞
HCC1937 人乳腺癌細胞
EBTr (NBL-4)牛胚氣管細胞
EJ-1人膀胱癌
KSY-1卡波斯肉瘤細胞
5637人膀胱癌
U251 MG人膠質(zhì)瘤細胞
U373MG人膠質(zhì)瘤細胞
SNB-19人膠質(zhì)瘤細胞
KNS-89人腦膠質(zhì)瘤細胞
B2-17人星型膠質(zhì)瘤細胞
HuT 78 人T淋巴瘤細胞
H9人T淋巴瘤細胞
H292人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
ZR-75-1人乳腺癌細胞
SHZ-88大鼠乳腺癌細胞
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