TMB (3 , 3 , 5 , 5 , -四甲基聯(lián)苯胺) 是辣根過氧化物酶 (HRP) 的顯色底物,可溶型TMB顯色底物工作液在HRP的催化下,形成藍(lán)色的可溶性產(chǎn)物,在370nm和652 nm處有主要吸收峰。加酸終止反應(yīng)后,藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌,可以在450 nm波長下測定,適用于ELISA,不推薦用Western Blot和IHC實驗。
沉淀型TMB為單組分試劑。沉淀型TMB在HRP的催化下形成不溶性深藍(lán)色產(chǎn)物,可在NC或PVDF膜上形成沉淀線,可用于Western Blot以及其它通過沉淀反應(yīng)檢測HRP的應(yīng)用??蓹z測低至0.15 ng蛋白質(zhì),效果穩(wěn)定,無需使用暗室及膠片等耗材,不推薦用于ELISA檢測