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特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為2-3代
包裝：內(nèi)層無菌自封袋；專用防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書
細(xì)胞來源：ATCC
貨期：1-2周
運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸
售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量 詳情介紹
感恩回饋，價(jià)格實(shí)惠，物美價(jià)廉，量大從優(yōu)，部分產(chǎn)品贈(zèng)送。。。。。。
上海素冉生物科技有限公司是一批由美國留學(xué)歸來的致力于服務(wù)中國生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家新型公司。公司自創(chuàng)辦以來，以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù)，贏得生物界老師的厚愛，您選擇素冉的理由： 產(chǎn)品齊全：囊括實(shí)驗(yàn)室儀器、設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室耗材、免疫生物學(xué)試劑、動(dòng)物生物學(xué)試劑、植物生物學(xué)試劑、微生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)試劑、遺傳學(xué)生物試劑、生物化學(xué)試劑、分子生物學(xué)試劑。 品牌齊全：囊括國內(nèi)外100多個(gè)知名品牌。 方便、快捷，訂貨周期短，選擇服務(wù)質(zhì)量好的快遞，全稱跟蹤，及時(shí)到達(dá)您的手中。素冉生物努力打造生物領(lǐng)域內(nèi)的京東商城。 平價(jià)：同等質(zhì)量的產(chǎn)品，我們這里價(jià)格實(shí)惠，為您節(jié)省每一分錢。 優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù)：實(shí)驗(yàn)過程，我們有技術(shù)全程跟蹤指導(dǎo)，若有問題，我們*時(shí)間為您處理，保證您售后無憂。 多姿多彩的技術(shù)服務(wù)：免疫學(xué)技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)、病理學(xué)檢測技術(shù)服務(wù)等。 總之，素冉生物是您值得信賴的地方：誠實(shí)正直，以客戶的切身利益為出發(fā)點(diǎn)，關(guān)注客戶，協(xié)助客戶一起成長！
公司全部產(chǎn)品進(jìn)入。。。
細(xì)胞名稱：HES人胚胎干細(xì)胞|HES細(xì)胞
培養(yǎng)基和添加劑
D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)12400024，添加L-glutamine 150mg/L, NaHCO3 1.5g/L)及0.005 mg/ml 胰島素，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。
供應(yīng)限制
A。僅供研究之用。
運(yùn)輸保存：采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)完全融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按指定條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
人胚胎干細(xì)胞一般培養(yǎng)方法:
1、組織塊培養(yǎng)法
A）按照前述方法取材，將組織剪成或切成1mm3大小的小塊，并加入少許培養(yǎng)基使組織濕潤。
B）將小塊均勻涂布于瓶壁，每小塊間距0.2 cm～12.5px，一般在25mL培養(yǎng)瓶（底面積為437.5px2）可接種20～30小塊為宜，小塊放置后，輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使瓶底朝上，然后于瓶內(nèi)加入適量培養(yǎng)基蓋好瓶塞，將瓶傾斜放置在37℃溫箱內(nèi)。
C）培養(yǎng)2～4小時(shí)，待小塊貼附后，將培養(yǎng)瓶緩慢翻轉(zhuǎn)平放，靜置培養(yǎng)，動(dòng)作要輕，嚴(yán)禁搖動(dòng)和來回振蕩，以防RL95-2人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞由于沖動(dòng)而使小塊漂起而造成培養(yǎng)失敗，若組織塊 不易貼壁可預(yù)先在瓶壁涂一薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。開始培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基不宜多，以保持組織塊濕潤即可，培養(yǎng)24小時(shí)后再補(bǔ)液，培養(yǎng)初期移動(dòng)和觀察時(shí)要輕 拿輕放，開始幾天盡量不去搬動(dòng)，以利貼壁和生長，培養(yǎng)3～5天時(shí)可換液，一方面補(bǔ)充營養(yǎng)，一方面去除代謝產(chǎn)物和漂浮小塊所產(chǎn)生的毒性作用。
2、消化培養(yǎng)法
該方法是采用前述的消化分散法，將妨礙細(xì)胞生長的細(xì)胞間質(zhì)（包括基質(zhì)、纖維等）去除，使細(xì)胞分散形成細(xì)胞懸液，然后分瓶培養(yǎng)。
3、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
細(xì)胞其它細(xì)胞株列表：
YBC3379 人腎癌細(xì)胞 A498-EGFP-puro
YBC3380 小鼠成纖維細(xì)胞 L929-EGFP-puro
YBC3381 人胃癌細(xì)胞 BGC-823-EGFP-puro
YBC3382 小鼠肝癌細(xì)胞 Hepa1-6-EGFP（CMV-GFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株）
YBC3383 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 P9-EGFP-puro
YBC3384 小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC-RFP-puro
YBC3385 人胚肺成纖維細(xì)胞 MRC-5-EGFP+puro
YBC3386 人骨肉瘤細(xì)胞 U-2 OS-EGFP+puro
YBC3387 人肝癌細(xì)胞（高轉(zhuǎn)移） MHCC-97H
YBC3388 人肝癌細(xì)胞（低轉(zhuǎn)移） MHCC-97L
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式：
（1）干冰運(yùn)輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇；
（2）存活細(xì)胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
（3）收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
HES 細(xì)胞人胚胎干細(xì)胞,ATCC細(xì)胞
規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為2-3代
包裝：內(nèi)層無菌自封袋；專用防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書
細(xì)胞來源：ATCC
貨期：1-2周
運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸
售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或E-mail致銷售人員，我們將盡快為您解決。
HES 細(xì)胞人胚胎干細(xì)胞,ATCC細(xì)胞復(fù)蘇基本技術(shù)：
●從液氮容器中取出細(xì)胞凍存管后，立即將細(xì)胞凍存管直接浸入37%水浴中，在1－2分鐘內(nèi)搖動(dòng)細(xì)胞凍存管至凍存的細(xì)胞融化。
●用75%酒精消毒細(xì)胞凍存管后，小心打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸浮液至15ml離心管中，緩慢加入5ml培養(yǎng)基后800rpm離心5分鐘，棄上清，加3－5ml培養(yǎng)基重懸至細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，然后放入5CO2、95%空氣、37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
注：建議使用新鮮配制的培養(yǎng)體系
●另外，細(xì)胞計(jì)數(shù)，確定細(xì)胞數(shù)量
●24小時(shí)更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)在5%CO2、95%空氣、37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
注：建議使用新鮮配制的培養(yǎng)體系
HES 細(xì)胞人胚胎干細(xì)胞,ATCC細(xì)胞注意事項(xiàng)：
1、 培養(yǎng)基于 4℃條件下可保存 3-6 個(gè)月；
2、 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作；
3、 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生 長狀態(tài)；
4、 該細(xì)胞只可用于科研。
HES人胚胎干細(xì)胞|HES細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；添加0.01mg/ml胰島素；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的同學(xué)看過來。原裝ATCC細(xì)胞現(xiàn)貨來啦。
選擇上海素冉生物細(xì)胞有3個(gè)理由：
1、細(xì)胞狀態(tài)好，形態(tài)佳，易成活，是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;
2、物流迅速，復(fù)蘇好后發(fā)貨，次日就能到;
3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，效果更佳。
專業(yè)技術(shù)人員李工收藏的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:
1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買，比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的介紹，這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細(xì)胞，還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊的做兩件事：檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天蕞好更換一次培養(yǎng)基。
3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會(huì)長的慢，可以買個(gè)支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
4. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快，比如說 MDA-MB-231，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢，比如 BT474，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。
5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住，是每天。
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方法
問題
原因
解決方案
細(xì)胞生長緩慢
生長培養(yǎng)基使用不當(dāng)
按照生產(chǎn)商的建議，使用相應(yīng)的預(yù)熱生長培養(yǎng)基。
生長培養(yǎng)基中血清質(zhì)量差
使用其他批次血清。
傳代操作不當(dāng)
按照生產(chǎn)商的建議消化時(shí)間及傳代比例進(jìn)行操作。
換液過于頻繁
降低換液頻率，參考生產(chǎn)商推薦的換液頻率。
細(xì)胞傳代次數(shù)過多
使用傳代次數(shù)較少的健康細(xì)胞。
細(xì)胞生長超過匯合狀態(tài)
哺乳動(dòng)物細(xì)胞傳代應(yīng)在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)進(jìn)行，建議細(xì)胞密度達(dá) 80-90%傳代。
細(xì)胞被支原體污染
將細(xì)胞、培養(yǎng)基和試劑丟棄；新取一只凍存細(xì)胞，并且使用新的培養(yǎng)基和試劑。
細(xì)胞復(fù)蘇存活率低
細(xì)胞凍存不當(dāng)
新取一只凍存細(xì)胞，并儲(chǔ)存在液氮中。將細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中，直至復(fù)蘇。
自行制備的凍存細(xì)胞無活性
將細(xì)胞按照生產(chǎn)商推薦的密度凍存。
制備凍存細(xì)胞時(shí)使用傳代次數(shù)少的細(xì)胞。
嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序凍存細(xì)胞。請(qǐng)注意本手冊(cè)推薦的冷凍程序是凍存細(xì)胞的一般流程，只能作為指導(dǎo)原則使用。
新取一只凍存細(xì)胞。
細(xì)胞復(fù)蘇方法不當(dāng)
嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序復(fù)蘇細(xì)胞。請(qǐng)注意本手冊(cè)推薦的解凍程序是復(fù)蘇細(xì)胞的一般流程，只能作為指導(dǎo)原則使用。
確保冷凍細(xì)胞解凍迅速，接種前用預(yù)熱的生長培養(yǎng)基緩慢稀釋細(xì)胞。
復(fù)蘇培養(yǎng)基使用不當(dāng)
使用生產(chǎn)商推薦的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基使用前已經(jīng)預(yù)熱。
細(xì)胞稀釋過度
按照生產(chǎn)商的建議，將解凍后的細(xì)胞高密度接種，以改善復(fù)蘇效果。
處理細(xì)胞時(shí)動(dòng)作不夠輕柔
凍存和復(fù)蘇過程對(duì)大多數(shù)細(xì)胞都會(huì)造成不利影 響。不要通過渦旋振蕩或者用力敲打培養(yǎng)瓶的方法使細(xì)胞脫落(培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞時(shí)除外)，也不要高速離心細(xì)胞。
凍存液中所用保護(hù)劑在儲(chǔ)存過程中未避光
如果未避光儲(chǔ)存，凍存保護(hù)劑會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)閷?duì)細(xì)胞有毒性的物質(zhì)；新取一只凍存保護(hù)劑，重新凍存細(xì)胞。
★由于細(xì)胞庫現(xiàn)有細(xì)胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯(cuò)誤，需要了解相關(guān)細(xì)胞價(jià)格及詳細(xì)資料直接call，對(duì)您造成的不便還請(qǐng)見諒！
★注：如運(yùn)輸過程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡，我們將無條件補(bǔ)發(fā)
收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價(jià)重發(fā)
最后，通過低溫保藏儲(chǔ)備一些細(xì)胞，以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象，或常規(guī)檢測呈陽性結(jié)果，那么較可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物，清潔培養(yǎng)箱和超凈臺(tái)，一切從頭開始。當(dāng)然，你得確保儲(chǔ)備的細(xì)胞是不含支原體的。
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，91化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
