文章標(biāo)題：M17細(xì)胞 細(xì)胞株培養(yǎng)

關(guān)鍵詞：M17細(xì)胞培養(yǎng)，M17細(xì)胞價(jià)格，M17細(xì)胞來(lái)源背景，M17細(xì)胞，細(xì)胞株培養(yǎng)

中文名稱(chēng)：人神經(jīng)母細(xì)胞瘤

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

1.試劑和溶液

1）轉(zhuǎn)印緩沖液：0.025M Tris base , 0.187 M甘氨酸 , 25%甲醇

2）氨基黑溶液：0.1% 酸性黑10B

3）1 TBST：25mM Tris-HCl ( pH 8.0 ) , 0.2 M NaCl ,0.1%Tween 20

4）封閉液：TBST配制的5%牛奶

5）抗體稀釋液：TBST配制的5%牛奶

6）顯色系統(tǒng)：ECL顯色

2.實(shí)驗(yàn)步驟

1電泳：將裂解液進(jìn)行SDS-PAGE電泳，80v，30分鐘，120v，90分鐘；

2轉(zhuǎn)膜：PVDF膜在甲醇中浸泡約30秒左右，濾紙浸泡在轉(zhuǎn)印緩沖液預(yù)濕，半干法轉(zhuǎn)印到PVDF膜上，10v，150分鐘；

3染色：氨基黑染色5分鐘，甲醇褪去背景色，觀察條帶；

4膜活化：將PVDF膜置于甲醇活化1min，用純水洗膜2次后再用TBST洗滌3次；

5封閉：將膜條置于5%牛奶或2% BSA中，室溫混搖2h；

6一抗孵育：將待檢抗體用3%牛奶或2% BSA稀釋到合適濃度（參照抗體說(shuō)明書(shū)，根據(jù)客戶(hù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，稀釋度上下浮動(dòng)一個(gè)數(shù)量級(jí)都為正常），將膜放入對(duì)應(yīng)的已稀釋待檢樣品中，置4℃混搖孵育隔夜；

7洗滌：取出膜放在TBST中洗滌3 5min；

8二抗孵育：將膜取出放入稀釋好的HRP標(biāo)記的二抗（參照二抗說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋?zhuān)┲?，室溫混搖2h；

9洗滌：取出膜放在TBST中洗滌3 5min；

10ECL顯色：將膜取出放入混勻的ECL顯色液中，孵育3min，將膜取出貼在有熒光角標(biāo)的膠片上，迅速用保鮮膜包好；

11曝光：把底片放在暗盒中，根據(jù)熒光強(qiáng)度分別對(duì)X光膠片作不同時(shí)間段的曝光，曝光結(jié)束后，將底片取出，1min顯影，30s清洗，1min定影，30s清洗，晾干；

12結(jié)果分析：用掃描儀將曝光后的X光膠片掃描，做后續(xù)結(jié)果分析。

選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞接種濃度。一般情況下，96孔培養(yǎng)板的一內(nèi)貼壁細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)時(shí)約有105個(gè)細(xì)胞。但由于不同細(xì)胞貼壁后面積差異很大，因此，在進(jìn)行MTT試驗(yàn)前，要進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其貼壁率、倍增時(shí)間以及不同接種細(xì)胞數(shù)條件下的生長(zhǎng)曲線(xiàn)，確定試驗(yàn)中每孔的接種細(xì)胞數(shù)和培養(yǎng)時(shí)間，以保證培養(yǎng)終止致細(xì)胞過(guò)滿(mǎn)。這樣，才能保證MTT結(jié)晶形成酌量與細(xì)胞數(shù)呈的線(xiàn)性關(guān)系。否則細(xì)胞數(shù)太多敏感性降低，太少觀察不到差異。

注意:細(xì)胞株的生物等級(jí)，由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品，所以從國(guó)外購(gòu)貨比較麻煩。

形態(tài)學(xué)改變:細(xì)胞體積明顯增大,為成熟淋巴細(xì)胞3-4倍。核膜清晰,核染色質(zhì)疏松呈網(wǎng)狀。核內(nèi)見(jiàn)明顯核仁1-4個(gè)。胞漿豐富,嗜堿性,有偽足樣突出。胞漿內(nèi)有時(shí)可見(jiàn)小空泡。

細(xì)胞培養(yǎng)是一種無(wú)菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無(wú)微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無(wú)煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無(wú)菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。

素爾細(xì)胞庫(kù)ATCC/ScienCell細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)|細(xì)胞培養(yǎng)基 *的ATCC細(xì)胞，ATCC傳代細(xì)胞，sciencell細(xì)胞，sciencell原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，原代細(xì)胞培養(yǎng)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，植物細(xì)胞培養(yǎng)提供者。 細(xì)胞培養(yǎng)基 主要經(jīng)營(yíng)品牌有ATCC，ScienCell，DSMZ，ALLCELLS，DV Biologics，Stemgent等，其中ATCC/ScienCell細(xì)胞zui為，傳代細(xì)胞，復(fù)蘇細(xì)胞，第二代細(xì)胞等，價(jià)格優(yōu)惠，買(mǎi)的放心，做實(shí)驗(yàn)也放心，歡迎訂購(gòu)！

相關(guān)熱賣(mài)細(xì)胞有：HOS細(xì)胞，143B細(xì)胞，NS-1細(xì)胞，IR983F細(xì)胞， LOX細(xì)胞， FO細(xì)胞， J558細(xì)胞， Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞，HT-22細(xì)胞，MC38細(xì)胞，SW48細(xì)胞，DC2.4細(xì)胞，U2OS細(xì)胞，U266細(xì)胞，RPMI 8226，MCM細(xì)胞，COV434細(xì)胞，H9C2細(xì)胞，Hep 3B細(xì)胞，MKN1細(xì)胞，KG-1a細(xì)胞，HL-60細(xì)胞，MV4-11細(xì)胞，U937細(xì)胞，MOLM-13細(xì)胞，MOLM-14細(xì)胞，K562細(xì)胞，CCRF-CEM細(xì)胞，HS 505.T細(xì)胞，SK-N-SH細(xì)胞等

選擇素爾生物的理由：

高質(zhì)量ATCC ScienCell DSMZ等知名品牌產(chǎn)品對(duì)您的研究非常重要

所有細(xì)胞入庫(kù)之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量檢測(cè)和鑒定

所有細(xì)胞在出庫(kù)之前均經(jīng)過(guò)一次嚴(yán)格的質(zhì)檢認(rèn)證

確保細(xì)胞到每一位用戶(hù)手里都是狀態(tài)

在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細(xì)胞發(fā)生凋亡早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，膜磷脂酰絲氨酸外翻的發(fā)生早于細(xì)胞核的變化，而此時(shí)Propidium Iodide（PI）不能通過(guò)細(xì)胞膜。

細(xì)胞壞死時(shí)，雖然也會(huì)發(fā)生磷脂酰絲氨酸外翻，但此時(shí)細(xì)胞膜的通透性明顯增加，PI等核酸染料進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞核中的核酸結(jié)合，發(fā)出紅色熒光。所以Annexin V-FITC(綠色熒光)常與鑒定細(xì)胞死活的核酸染料（如PI）合并使用，來(lái)區(qū)分凋亡細(xì)胞與死亡細(xì)胞。

技術(shù)原理及步驟

1. 離心收集細(xì)胞，微量離心機(jī)轉(zhuǎn)速1000 rpm，離心時(shí)間5 min，棄培養(yǎng)基。

2. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次。

3. 用400 L1 Binding Buffer懸浮細(xì)胞，濃度大約為1 106 cells/mL。

4. 在細(xì)胞懸浮液中加入5 lLAnnexin V-FITC，輕輕混勻后于2~8 C避光條件下孵育15min。

5. 加入10 L PI后輕輕混勻于2~8 C避光條件下孵育5 min。

6. 在1小時(shí)內(nèi)用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè)。

應(yīng)用實(shí)例

應(yīng)用領(lǐng)域

細(xì)胞的早期凋亡及區(qū)分凋亡與壞死細(xì)胞

服務(wù)周期

我公司在正式接受實(shí)驗(yàn)委托2個(gè)星期左右完成實(shí)驗(yàn)并提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

客戶(hù)須知（對(duì)材料的要求、注意事項(xiàng)）

需提供細(xì)胞類(lèi)型，處理?xiàng)l件。

上海素爾生物供應(yīng)細(xì)胞株細(xì)胞系  部分細(xì)胞產(chǎn)品現(xiàn)貨，復(fù)蘇周期短，平價(jià)，狀態(tài)好?。?p>細(xì)胞株細(xì)胞系

英文名稱(chēng)

中文名稱(chēng)

價(jià)格

NFS-60

NFS-60細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Human bel7402

人肝癌細(xì)胞系

詢(xún)價(jià)

Human Dul45

人前列腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Human WRO

Human WRO

詢(xún)價(jià)

Human ARO

Human ARO

詢(xún)價(jià)

Human panc28

人胰腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

human PNT1A

human PNT1A

詢(xún)價(jià)

mouse N3

mouse N3

詢(xún)價(jià)

human MCF10A

人正常乳腺上皮細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

BT549

人乳腺細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

CaCo2

人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

SGC7901

人胃癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HCT116

人結(jié)腸癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MC3T3-L1

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

C3H10

小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞系

詢(xún)價(jià)

HCT8

人結(jié)腸癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MGC-803

人胃癌細(xì)胞系

詢(xún)價(jià)

ACDC5

ACDC5

詢(xún)價(jià)

293Ampho

293Ampho

詢(xún)價(jià)

2HO-MEF

2HO-MEF

詢(xún)價(jià)

ATDC5日本

ATDC5

詢(xún)價(jià)

SL4

SL4

詢(xún)價(jià)

HMEC-1

人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株

詢(xún)價(jià)

Hut78

人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

SNU-398

人肝癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

SNU-449

人肝癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

SNU-475

人肝癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Y79

人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤

詢(xún)價(jià)

AML12 

小鼠肝細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HA-VSMC

人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

A-204

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

PL45

人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Panc 10.05

人胰腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

NCI-H508 [H508]

人結(jié)腸直腸腺癌

詢(xún)價(jià)

SK-N-DZ

人成神經(jīng)瘤細(xì)胞-骨髓

詢(xún)價(jià)

NCI-H441 [H441]

人肺腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

WM-266-4

人黑素瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HT-1376

人膀胱癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

RWPE-2

人正常前列腺上皮細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

COLO 320HSR

人結(jié)腸癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Ramos（RA1）

人B淋巴細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

T98G [T98-G]

人多形性惡性膠質(zhì)瘤

詢(xún)價(jià)

T2(174 CEM.T2)

人淋巴母細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

BE(2)-C

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

KYSE-450

人食管癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

JF-305

人胰腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

EAhy926

人臍靜脈融合細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

NCI-h1688

人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

EC9706

人食管癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HT1080

人纖維肉瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Pfeiffer

人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

3AO

人卵巢癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

PLA-802

人惡性橫紋肌肉瘤

詢(xún)價(jià)

CA46

人淋巴瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

GP2-293

人胚腎上皮包裝細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

LM3

高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MHCC97-H

高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞 

詢(xún)價(jià)

MHCC97-L

低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HSF

人皮膚成纖維細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

G422

小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

BALL-1

人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Hep 3B-s3

人宮頸癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HMC

人腎小球系膜細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MDCK (NBL-2)

馬-達(dá)二氏犬腎細(xì)胞系

詢(xún)價(jià)

PT-K75

豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

LTPA

小鼠胰腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

DSL-6A/C1

大鼠胰腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

SP2/MIL-6

小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

DI TNC1

大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

IEC-18

大鼠回腸細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Sp2/0-Ag14

小鼠骨髓瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

JB6 Cl 30-7b

小鼠表皮細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

WB-F344

大鼠肝上皮樣干細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

GH3

大鼠垂體瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

BRL3A

大鼠正常肝細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

PK15

豬腎細(xì)胞系

詢(xún)價(jià)

Bv-2

小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HSC-T6

大鼠肝星形細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

J774A.1

小鼠單核巨噬細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

SV40-MES-13

小鼠腎小球系膜細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)

小鼠淋巴瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MA-891

小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Marc145

猴腎細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

ROS1728

大鼠成骨細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

B16F1

小鼠黑色素瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

AGS 胃癌

詢(xún)價(jià)

MKN-45 胃癌

詢(xún)價(jià)

Hep 3B-mock

轉(zhuǎn)染了microRNA-mock基因的陰性對(duì)照細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

GT1.1 /GT1-1

小鼠垂體瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

BNP-9

詢(xún)價(jià)

mouse podocyte

腎小球足細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

AR42J

大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

PC-9

人肺腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MKN-74

胃癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

CaES-17

人食管癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

TE-13

人食管癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

LTEP- -2細(xì)胞

人肺腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MCF-7/ADR

人乳腺癌細(xì)胞（耐藥）

詢(xún)價(jià)

COC1

人卵巢癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

IGROV1

人卵巢癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

SKOV3/DDP

人卵巢癌細(xì)胞（耐藥）

詢(xún)價(jià)

HTR-8

人滋養(yǎng)細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

NCI-H295R

人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

H4-II-E-C3

大鼠肝癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

ARPE-19

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

RGC-5

小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞株細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

NCI-h1688

人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

BEAS-2B

人支氣管上皮細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

RPMI 8226

人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

K562/ADP

K562耐阿霉素細(xì)胞株

詢(xún)價(jià)

BEND.3

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株

詢(xún)價(jià)

MHCC97-H

高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MHCC97-L

低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

CmESCs-11

小鼠胚胎干細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

U87 MG

人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

YAC-1

小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞)

詢(xún)價(jià)

ECA109

人食管癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HO8910

卵巢癌

詢(xún)價(jià)

HO8910PM

卵巢癌

詢(xún)價(jià)

INS-1

大鼠胰島素瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

NCTC 1469

小鼠正常肝細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

STO

小鼠胚胎纖維細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

PT-67

小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝株

詢(xún)價(jià)

MeT-

人膜間皮細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Ishikawa

子宮內(nèi)膜癌

詢(xún)價(jià)

MDA-kb2

人正常乳腺細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

SGC-7901/DDP

人胃癌耐藥順鉑細(xì)胞株

詢(xún)價(jià)

A375.S2

人黑色素瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

OPM-2

人骨髓瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

F56

人腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Tsu-Pr1

人非雄激素依賴(lài)型前列腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

MT-4

人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Patu 8988

人胰腺癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

HNE2

人鼻咽癌細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

Farage

人B淋巴瘤細(xì)胞

詢(xún)價(jià)

選擇素爾生物的理由：

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所有細(xì)胞入庫(kù)之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量檢測(cè)和鑒定

所有細(xì)胞在出庫(kù)之前均經(jīng)過(guò)一次嚴(yán)格的質(zhì)檢認(rèn)證

確保細(xì)胞到每一位用戶(hù)手里都是狀態(tài)

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