(一)培養(yǎng)基原料的選擇
在菌種制備過程中,從母種、原種至栽培種,各個(gè)階段的目的要求有所不同,所選用的培養(yǎng)基的配比也應(yīng)有所區(qū)別。母種初生菌絲一般較嫩弱,分解養(yǎng)分能力差,要求營養(yǎng)豐富、完全,氮源、維生素的比例應(yīng)高,須選用易被菌絲吸收利用的物質(zhì),如葡萄糖、蔗糖、馬鈴薯、玉米粉、麥芽汁、酵母汁、蛋白胨、無機(jī)鹽類及生長素等為原料。原種和栽培種所需數(shù)量較多,且菌絲分解養(yǎng)分能力強(qiáng),可選用農(nóng)作物的秸桿、糞草、鋸木屑、麩皮、米糠等原料作為培養(yǎng)基。
(二)營養(yǎng)成分的配比
培養(yǎng)基中的碳、氮比例很重要。若培養(yǎng)基中碳源供應(yīng)不足時(shí),易引起菌種的過早衰老和自溶;若氮源過多或過少,則會引起菌絲過于旺盛生長或生長緩慢,對菌種培養(yǎng)不利。菌種培養(yǎng)基中的pH值也是影響菌絲生長的重要因素。一般培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后會使pH值有所下降,必須經(jīng)檢驗(yàn)后加以調(diào)整。調(diào)節(jié)pH值時(shí),可用石灰澄清液,也可用氫氧化鈉或鹽酸。 在配制培養(yǎng)基時(shí),為了避免沉淀物的生成而造成營養(yǎng)物的損失,應(yīng)掌握加入各種營養(yǎng)物的順序。一般應(yīng)先加入緩沖化合物,溶解后加入主要元素,然后是微量元素,zui后加入維生素等,是前一種營養(yǎng)成份溶解后再加入第二種營養(yǎng)成份。此外,培養(yǎng)基加入糖類時(shí),應(yīng)采用適當(dāng)?shù)臏缇椒?,因葡萄糖在高壓下易被破壞,多糖和雙糖也因高溫易被水解和變質(zhì)。
二、培養(yǎng)基的類型
培養(yǎng)基的種類繁多,分類方法主要是按其成分、物理狀態(tài)、用途等分類。
(一)根據(jù)營養(yǎng)物質(zhì)來源分類
1.天然培養(yǎng)基 是用營養(yǎng)豐富的天然有機(jī)物配制而成。如木屑、稻草、麥粒、米糠、蔗渣、棉籽殼和動植物浸出液(土豆煎汁、麥芽汁、牛肉膏)等。都是配制天然培養(yǎng)基的原料。這些有機(jī)物來源廣、價(jià)格低廉、使用方便,但其化學(xué)成分不恒定,即人們在使用時(shí)不能完全掌握它的化學(xué)成分,這類培養(yǎng)基只能用于生產(chǎn),不適宜作的科學(xué)實(shí)驗(yàn)。
2.合成培養(yǎng)基 是用已知其化學(xué)成分的各類營養(yǎng)物質(zhì),定量地配制而成。適用于專門的營養(yǎng)生理等研究。生產(chǎn)上使用較少。
3.半合成培養(yǎng)基 是指在天然培養(yǎng)基中,添加一些已知成分的營養(yǎng)物質(zhì)。在生產(chǎn)上應(yīng)用較多。
(二)根據(jù)培養(yǎng)基質(zhì)的物理性狀分類
1.液體培養(yǎng)基 是將食用菌生長發(fā)育所需的營養(yǎng)物質(zhì),按一定比例配制的營養(yǎng)液。菌絲體在這種培養(yǎng)基中生長迅速,在短時(shí)間內(nèi)可生出大量的菌絲體。這些菌絲體可作為各級種使用,充分縮短生長周期。但液體培養(yǎng)基的深層發(fā)酵工藝要求嚴(yán)格,成本投資大。另一方面是生產(chǎn)的菌種菌齡較難控制且易老化。
2.固體培養(yǎng)基 常見的固體培養(yǎng)基有兩類:一是將液體培養(yǎng)基加入凝固劑(如瓊脂),制成常見的試管斜面或培養(yǎng)皿平板。這種培養(yǎng)基多用于菌種的分離、純化或擴(kuò)大保存。另一類是利用天然纖維物質(zhì)或固形物,如木屑、秸桿、棉殼、廢棉、土壤、畜糞等,加入適量的輔助營養(yǎng)料和水配制而成的培養(yǎng)基,生產(chǎn)上應(yīng)用很廣。
3.半固體培養(yǎng)基 這類培養(yǎng)基配制后呈軟膏狀,國外有部分應(yīng)用,國內(nèi)生產(chǎn)上很少用。
(三)根據(jù)用途分類
根據(jù)用途將培養(yǎng)基質(zhì)分為母種培養(yǎng)基,原種培養(yǎng)基、栽培種培養(yǎng)基三種類型。
(四)根據(jù)表面形狀分類
1.斜面培養(yǎng)基 將滅菌瓊脂培養(yǎng)液注入試管,放置成斜面凝固而成。用于菌種擴(kuò)大轉(zhuǎn)管及菌種保藏。
2.平面培養(yǎng)基 將滅菌瓊脂培養(yǎng)液倒入培養(yǎng)皿與三角燒瓶中凝固而成。用于菌種分離及研究菌類的某些特性。
3.高層培養(yǎng)基 將瓊脂培養(yǎng)基注入試管內(nèi),滅菌,但不擺成斜面。這樣接入菌種后雖然發(fā)育的面小了一點(diǎn),但培養(yǎng)基的厚度增大,營養(yǎng)豐富,時(shí)間長些也不容易干燥、開裂。常用于保存菌種
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