一、旨在了解到紅細胞枚舉框的構(gòu)造,握有采用和計算方法。二、科學(xué)儀器與材質(zhì)顯微、紅細胞枚舉框、移液管、細菌滴(準備好不見紅皮書)。三、紅細胞枚舉框的構(gòu)造和計算方法紅細胞枚舉框由木頭比平常載玻片厚度的特制玻片材質(zhì)。玻片和中央刻著四條筒,和中央兩條筒間的三角形比其他三角形略低于,和中央有其余部分筒,筒的兩端的三角形上各刻著9個大格子,和中央的一個大格子為枚舉四樓,其長和高約各為1mm,厚度為0.1厚度,其尺寸為0.1mm3。枚舉四樓有兩種尺寸:一種是把大格子細分16中格,每三中格細分25盤上,總計400盤上;另一種尺寸是把大格子細分25中格,每三中格細分16盤上,總計也是400盤上。計算方法如下:1.16×25的枚舉框之比蛋白將近/mg:100盤上內(nèi)的蛋白將近/100×400×10×1000×揮發(fā)乘積。2.25×16的枚舉框之比蛋白將近/mg:80盤上內(nèi)的蛋白將近/80×400×10×1000×揮發(fā)乘積。四、操作步驟(1)揮發(fā)試樣,為了便于枚舉,將試樣合理揮發(fā),使每格左右含有5個蛋白。(2)收清潔的紅細胞枚舉框,用厚蓋玻片露出和中央的枚舉四樓,用移液管吸收少許必要搖勻的待測菌液于蓋玻片的外緣,菌液則再行滲透枚舉四樓,晾干5~10分鐘需枚舉。(3)將紅細胞枚舉框放置載物臺上,用低倍光找尋小格子后換高倍光通過觀察枚舉。需要迅速高處、下旋動鈍后座,以便見到枚舉戶外相同厚度的菌種。現(xiàn)以16×25尺寸的枚舉板為例,將近四個角(從右上、從右上、從右下、從右下)的四個之中格(即100盤上)的細菌將近。如果是25×16尺寸的枚舉框,除取四個角上三中極為,還取門楣的一個之中格(即80盤上)。對座落大格線上的細菌只計大格的頂部及右側(cè)線上的細菌,或只計底部及左邊線上的細菌。每個試樣段落枚舉3次,收平均數(shù),便按關(guān)系式數(shù)值每毫升菌液中所含的細菌將近。(4)沖洗紅細胞枚舉框。采用再行后,將紅細胞枚舉框在水管上用噴出洗滌,務(wù)必用刀子洗清,洗完后再行蒸熟或用吹風(fēng)機吹干。鏡檢,通過觀察每盤上內(nèi)應(yīng)該有存留菌種或其他雜質(zhì)。若不清潔,則需要段落沖洗至清潔為止。思考題1.結(jié)果:將結(jié)果歷史記錄于下表中。E指出5個之中格子之中的總菌數(shù);C指出菌液揮發(fā)乘積。2.為什么用兩種相同尺寸的枚舉板測同一試樣時,其結(jié)果一樣?3.在枚舉框枚舉方式中之中,指明紅細胞枚舉框枚舉的偏差主要來自哪些方面?應(yīng)當如何盡可能減少偏差,以求正確?4.如何恰當采用枚舉框枚舉?其操作步驟和崗位理論是什么?如何開展數(shù)值?5.除枚舉框可以開展病原體蛋白枚舉以外,還有哪些新方法可以開展蛋白枚舉?