ELISA試劑盒 人腸道病毒71型IgM抗體(EV71-IgM)ELISA試劑盒,技術(shù)指導免費代測
上海信帆生物科技有限公司
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生產(chǎn)地:品牌:AMRESCO
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上海信帆生物科技有限公司專注于生命科學和生物醫(yī)學領(lǐng)域,集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的新型高科技公司。為各大高校,科研單位、醫(yī)院、制藥與診斷試劑生產(chǎn)廠家等客戶提供多種生物學檢測試劑盒,進口常規(guī)生化試劑、抗體、化學試劑、藥典級試劑、標準品、血清等產(chǎn)品。覆蓋分子生物學、生物化學,細胞生物學、免疫學、蛋白組學、生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 經(jīng)過多年的高速發(fā)展,我們先后取得了美國Sigma、Spectrum、BD、R D、abcam、santa、hyclone、gibco、NQBB、invtrgen、IBL、Axygen 、 Mettlet ToLEDo、Rainin、Amresco、Schott Duran 、Sartorius、Rephile、shentex、Microgard等眾多國際知名品牌的中國區(qū)的代理。 公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設,我們采用了先進的內(nèi)部供應鏈信息處理平臺,保證客戶訂單的準確、高效處理。我們的客戶關(guān)系管理系統(tǒng)和客戶關(guān)系管理團隊,能率先時間響應客戶的售前、售后需求,關(guān)注客戶體驗及滿意度。我們擁有上百名專業(yè)的客戶服務工程師,為您提供專業(yè)、耐心的服務 我們專業(yè),所以值得信賴;我們專注,所以我們高速發(fā)展;我們信奉 客戶至上 我們堅持 誠信創(chuàng)新,合作共贏 ;我們將竭盡所能,為您提供Z便捷、Z專業(yè)的采購服務,節(jié)省您的時間和成本。 我們堅信,經(jīng)過我們的不懈努力,信帆生物將成為 生命科學及化學領(lǐng)域Z專業(yè)、規(guī)模較大、品種Z全及配套服務Z完善的的專業(yè)供應商 ,為用戶在生化科學領(lǐng)域提供 一站式 服務,成為這個行業(yè)的標桿。
人腸道病毒71型IgM抗體(EV71-IgM)ELISA試劑盒,技術(shù)指導免費代測 本試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中小鼠雌激素(E)的含量。 ELISA技術(shù)原理:以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底 物的高效催化作用相結(jié)合起來 1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。 2. 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。 3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。 4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記 的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。 5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。 6. 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量 與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定 性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重復性好。
人腸道病毒71型IgM抗體(EV71-IgM)ELISA試劑盒,技術(shù)指導免費代測
樣本處理及要求: 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。 2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 人腸道病毒71型IgM抗體(EV71-IgM) ELISA試劑盒
操作步驟 1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L ,10ng/L,5ng/L, 2.5ng/L)。 2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同3。 8. 洗滌:操作同5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。 11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。 注意事項: 1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。 2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。 3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 4. 請每次測定的同時做標準曲線,zui好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6. 底物請避光保存。 7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準. 8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 9. 本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。 選擇上海信帆生物,選擇zui優(yōu)質(zhì)的人腸道病毒71型IgM抗體(EV71-IgM) ELISA試劑盒
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